环糊精聚合物结合核酸探针检测小分子和DNA的研究

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环糊精聚合物由于具有协同效应、交联剂效应、邻基效应及多价结合效应,表现出比环糊精单体更强的客体分子识别能力。将环糊精聚合物应用于分析检测,可望增强检测信号,提高检测灵敏度。基于环糊精聚合物的荧光增强效应,本论文发展了基于环糊精聚合物和核酸探针的复合荧光探针,包括以下三部分内容:1.制备了四种环糊精聚合物,包括线型β-环糊精聚合物(L-β-CDP)、线型γ-环糊精聚合物(L-γ-CDP)、吊铃状β-环糊精聚合物(P-β-CDP)、吊铃状γ-环糊精聚合物(P-γ-CDP),这些环糊精聚合物能够与双标芘DNA链(dPy-DNA)形成复合物探针。考察了这些探针用于金刚烷胺检测的可行性,结果表明,四种复合物探针中,P-γ-CDP/dPy-DNA复合物探针对金刚烷胺的检测灵敏度最高,可用于金刚烷胺的定量检测。该方法检测下限为0.1mmol/L,同时表现出良好的特异性。2.基于胆固醇和双标芘DNA链与吊铃状β-环糊精聚合物的竞争结合作用,以及环糊精聚合物的荧光增强效应,发展了一种检测胆固醇的荧光开关探针。双标芘DNA链与吊铃状β-环糊精聚合物形成复合物探针,荧光得到显著增强;当胆固醇存在时,胆固醇与环糊精聚合物竞争结合,双标芘DNA链被释放出来,使得复合物探针的荧光被部分猝灭,从而实现对胆固醇的高灵敏检测。该方法检测下限为0.1μmol/L,特异性好。3.基于线型β-环糊精聚合物的荧光增强效应发展了一种DNA检测的新方法。线型β-环糊精聚合物能够与双标芘DNA链形成复合物探针,荧光得到显著增强;当体系中存在目标链时,目标链与双标芘DNA链竞争结合,破坏复合物探针,使得复合物探针的荧光被部分猝灭,荧光强度降低。基于这一机理,实现了肿瘤相关基因p53DNA的定量检测。该工作为环糊精聚合物在检测DNA方面的应用提供了新的思路。
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