飞龙掌血抗炎镇痛、抗RA活性研究

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研究背景:飞龙掌血[ToddaliaasiaticaLam.],其根或根皮在湖北恩施等地区长期被民间用于治疗跌打损伤、腰腿疼痛、风湿性关节炎、肋间神经痛等,且疗效显著,具有活血化瘀的功效。类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)是一种以关节及关节周围组织的非感染性炎症为主的全身性自身免疫性疾病,其病理特点为关节滑膜的慢性炎症,炎性细胞浸润,血管翳形成,软骨及骨组织的破坏,以及关节结构的破坏与功能的丧失。RA目前仍是一种难以治愈的疾病,误诊率和不合理用药率较高,且西医尚无特异有效的根治本病的疗法或药物,今年来中医药治疗本病以其具有调节整体功能、疗效稳定、副作用小的特点,日益被人们所关注。研究目的:为了证实飞龙掌血的药理作用以进一步扩大使用,且为了筛选飞龙掌血抗炎镇痛及抗RA活性部位以进一步开发新药,本研究对产于湖北恩施自治州的飞龙掌血根皮[RadixToddaliaeAsiaticae]进行了系统的基础药理研究。本实验通过体内整体动物模型的建立对飞龙掌血乙醇提取物及各部位浸膏的镇痛、抗炎及抗类风湿性关节炎的活性进行了系统的评价。同时对飞龙掌血抑制II型胶原诱导的小鼠关节炎(typeIIcollagen-inducedarthritis,CIA)的作用机制进行了更深入的研究:考察其对于小鼠外周血清中促炎性细胞因子TNF-α(tumournecrosisfactoralpha)、IL-1β(interleukin-1beta)、IL-6(interleukin-6)的调控作用及对于抑炎性细胞因子IL-10(interleukin-10)的调控作用,研究给药组、模型对照组与正常对照组三者之间是否有显著性差异及相关性,从而探讨这些细胞因子在CIA发病过程中的作用,以更深入了解RA的发病机制。研究方法:1)实验采用小鼠醋酸扭体动物模型对飞龙掌血乙醇提取物及各部位浸膏进行了镇痛活性评价及活性部位筛选;2)实验采用二甲苯致小鼠耳肿胀动物模型对飞龙掌血乙醇提取物及各部位浸膏进行了抗急性炎症活性评价及活性部位筛选;3)实验采用牛II型胶原诱导性小鼠关节炎(typeIIcollagen-inducedarthritis,CIA)动物模型对飞龙掌血乙醇提取物及各部位浸膏进行了抗类风湿性关节炎(RA)活性评价及活性部位筛选,并通过ELISA测定细胞因子方法对该药材抗RA的作用机制进行了探讨。研究结果:1)在醋酸致小鼠扭体反应疼痛模型中,飞龙掌血乙醇总膏及其乙酸乙酯部位、生物碱部位浸膏有一定的镇痛作用,且基本呈剂量依赖关系,其中飞龙掌血乙醇总膏及其乙酸乙酯部位浸膏抗炎作用较明显,高中剂量均与模型对照组有显著性差异(P<0.05);2)在二甲苯致小鼠耳肿胀炎症模型中,飞龙掌血乙醇总膏及其乙酸乙酯部位浸膏均有一定的抗炎作用,且基本呈剂量依赖关系,其中飞龙掌血乙醇总膏及其乙酸乙酯部位浸膏抗炎作用较明显,高中剂量均与模型对照组有显著性差异(P<0.05)。由实验结果我们得出飞龙掌血乙醇总提取物具有有效的抗炎镇痛活性,且其乙酸乙酯部位活性较其它部位更为显著,可初步确定其有效活性部位为乙酸乙酯部位;3)本研究建立了RA的一种常见的整体动物病理研究模型:牛II型胶原诱导的小鼠关节炎模型(CIA)。观察了飞龙掌血甲醇总膏及其各萃取部位对CIA小鼠的关节炎发展的抑制作用,评价其是否能有效降低小鼠外周血清中不同细胞因子水平,据此证实了飞龙掌血具有明显的抗RA作用,并确定活性部位,与我们前期研究的抗炎镇痛的活性部位基本一致,且证实飞龙掌血及其活性部位可以抑制CIA小鼠免疫器官重量,可以明显下调CIA小鼠体内促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平,对抗炎因子IL-10有上调作用。综上所有结果,我们推测飞龙掌血抗RA可能的作用机制包含了其广泛地影响各种细胞因子水平,从而调整并维持了机体整个细胞因子网络的平衡。
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