诺帝对人肺腺癌细胞系A549生长的影响与机理探讨

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肺癌是最为常见的恶性肿瘤之一。近年来,虽然采取了多种治疗措施,但肺癌的5年生存率仅为10%~13%。因此,探索治疗肺癌的新途径具有重要意义。在最近的几十年里,细胞的诱导分化治疗得到广泛的研究。我们既往研究发现,去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)对胶质瘤的体内外生长具有显著的抑制作用,但其体外抗肺癌作用研究较少。诺帝为我所基于NDGA的化学结构自行合成的高纯度化合物,其体内外抗肿瘤作用尚待进一步研究。本研究应用MTT法、流式细胞术、免疫组化、光镜和透射电镜技术观察诺帝对人肺腺癌细胞系A549细胞生长的影响,旨在为肺癌的治疗以及诺帝的临床应用提供实验依据。主要结果与结论如下:1.100μM诺帝处理A549细胞后,在不同时相点(12h、24h、48h、72h)均表现出诱导分化效应。光镜下见细胞异型性变小,核分裂像减少,核分裂指数降低。透射电镜下可见细胞核有规则,核仁变小;线粒体肿胀,断裂;并可见髓鞘样结构;粗面内质网脱颗粒。这些结果提示,诺帝对A549细胞有抑制增殖和诱导分化作用。2.不同浓度(50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L)诺帝处理A549细胞后,在不同时相点(24h、48h、72h、96h),与对照组相比,其增殖速度明显降低。细胞数的增加随浓度升高、时间的延长而明显受到抑制,即具有明显的量效和时效性。半数细胞抑制药物浓度(IC50)为 62.5μmol/L。3.细胞周期分析及凋亡检测发现,诺帝作用12h、24h和48h后,与对照组相比,A549细胞出现G1期细胞比例增加,而G2/M期和S期细胞比例减少,同时细胞凋亡率也逐步升高。这些结果表明,诺帝使癌细胞增殖受阻于G1→S期,并诱导了凋亡。 4.免疫组化结果显示100μmol/L诺帝处理12h、24h和48h后,A549细胞PCNA、bcl-2、vimentin蛋白表达减弱。结果提示,PCNA、bcl-2、vimentin蛋白表达的下调可能与诺帝的抗肺癌作用机制有关。 上述实验结果表明,诺帝对人肺腺癌细胞系A549体外生长作用的影响与我们既往使用的植物提取物NDGA的作用相似。该研究为诺帝治疗肺癌提供了实验依据。
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