传统抗生素的毒副作用及其耐药菌株的出现,迫使人们寻找新型的抗微生物制剂。抗菌肽(ABP)是由动物、植物、昆虫以及人体基因组编码的具有抗生素样活性的肽类物质。它是机体免疫系统的重要成分,构成宿主防御病源微生物入侵的第一道屏障。抗菌肽除了具有分子量小、热稳定性好、免疫原性较低等特点,还由于其独特的化学结构,能有效抑杀真菌、病毒、细菌、寄生虫,而不易产生耐药性,能选择性杀灭肿瘤细胞,而对人畜毒副作用极小。 本研究根据GenBank中提交的序列,以果蝇总RNA为模板,利用两步法RT-PCR技术,扩增出两端加入了酶切位点和保护碱基的攻击素(AttacinC)基因,将接头处理成粘性末端,可以与经过BamHI及SalI酶切后的pET-30a(+)表达载体正确连接。将AttacinC基因与原核表达载体pET-30a(+)重组,构建重组原核表达载体pET-30a(+)/AnacinC,经菌落PCR和质粒PCR鉴定,证明目的基因已整合入原核表达载体pET-30a(+)中,挑选阳性克隆用IPTG进行诱导表达,以SDS-PAGE分析表达产物,表达蛋白的相对分子量约为25KD,与预期分子量大小一致。用琼脂糖扩散法检测上清液的生物学活性,观察到明显的抑菌圈,显示其能较强的抗革兰氏阴性菌。并且,进一步的实验说明不同的诱导时间显示出不同的抗菌活性。结果表明该种抗菌肽能很好的在大肠杆菌系统中得到表达,这些特性使该抗菌肽具有非常诱人的应用前景,并且为以后进一步的药学分析研究及工业批量生产奠定了基础。