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实验目的:研究DDX4(VASA)在卵巢癌中与CD133基因和蛋白水平的差异性表达,从而探讨其可能的临床应用价值。CD133是最常见的肿瘤干细胞标志物,在其已获得的研究成果基础上,通过DDX4(VASA)与CD133表达的比较,结合DDX4(VASA)自身的特异性,推测出其对于卵巢癌潜在的利用价值。研究方法:1、利用卵巢癌细胞株SKOV3,通过QRT-PCR的方法,从基因水平检测VASA和CD133表达差异;2、利用卵巢癌细胞株SKOV3,通过Western Blot的方法,从蛋白水平检测DDX4和CD133表达差异;3、同时以体内正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织、卵巢交界性肿瘤组织、卵巢癌组织为研究对象,利用免疫组化的方法检测DDX4(VASA)在其中的表达及分布情况。结果:1、在卵巢癌细胞SKOV3中,VASA m RNA相对量delta delta CT值分别为:0.000133、9.52E-05、0.000103;CD133 m RNA相对量delta delta CT值分别为:2.26E-05、3.5E-05、3E-05。VASA m RNA的表达水平明显高于CD133 m RNA;2、在卵巢癌细胞SKOV3中,DDX4蛋白的表达水平高于CD133:DDX4、CD133蛋白的相对含量为DDX4、CD133蛋白条带密度/GAPDH条带密度。经条带灰度扫描显示DDX4的表达量接近于CD133表达量的2倍;3、DDX4(VASA)在卵巢癌组织中相对高表达,且在不同卵巢癌组织类型中分布位置不同:在卵巢浆液性囊腺癌组织中,癌细胞形成片状和不规则腺腔,浆阳性;在卵巢粘液性囊腺癌组织中,肿瘤细胞大,分泌粘液,细胞核大深染,DDX4(VASA)主要分布于腺体周围,浆阳性;在卵巢透明细胞癌组织中,癌细胞大而圆,胞质透明,核染色,DDX4(VASA)主要分布于细胞质中。结论:以上实验结果提示,DDX4(VASA)很可能作为新一代卵巢癌肿瘤干细胞的特异性标志物,其高表达与卵巢癌的发生、发展密切相关,由此,检测DDX4(VASA)在卵巢癌中的差异性表达,对了解卵巢癌的生物学行为、完善卵巢癌的早期诊断和改善疾病的预后有至关重要的作用。