【摘 要】
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微流控芯片因其高通量、反应迅速、试剂消耗低的特点广泛应用于生物医学、细胞检测学、高分子量蛋白质检测等研究领域,是目前较新型、全面的综合检测分析手段。实现细胞分选和单细胞捕获是细胞学分析、生物学研究、临床诊断等领域研究的重要要求,微流控芯片满足了细胞分选、捕获的高效率、高精度要求,是实现细胞分选、单细胞捕获的理想手段。根据激光的电磁理论,结合粒子在光场中的几何光学模型,提出了嵌入式光纤微流控细胞分选
【基金项目】
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江苏省基础研究计划(自然科学基金)青年基金项目“基于集成光流控平台的单细胞间通讯机制研究”(BK20150406)
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微流控芯片因其高通量、反应迅速、试剂消耗低的特点广泛应用于生物医学、细胞检测学、高分子量蛋白质检测等研究领域,是目前较新型、全面的综合检测分析手段。实现细胞分选和单细胞捕获是细胞学分析、生物学研究、临床诊断等领域研究的重要要求,微流控芯片满足了细胞分选、捕获的高效率、高精度要求,是实现细胞分选、单细胞捕获的理想手段。根据激光的电磁理论,结合粒子在光场中的几何光学模型,提出了嵌入式光纤微流控细胞分选芯片的设计方案;利用COMSOL Multiphysics仿真软件模拟激光光纤作用下细胞在微通道中的运动情况,研究光辐射压力及细胞尺寸对细胞运动轨迹的影响,得出光辐射压力对不同尺寸细胞的作用机制,设计出可高效分选细胞的嵌入式光纤微流控芯片。为了操纵细胞在微通道内的运动,利用微通道中的鞘流技术,通过改变鞘流通道的流量和流速控制聚焦宽度,实现细胞成列通过微流控芯片通道,并实现不同尺寸细胞的聚焦;采用软光刻技术及模塑法制备微流控芯片,在1064nm波长、100m W功率激光光纤作用下,实现了聚苯乙烯微球的偏转,分选效率达到85%。为了实现细胞分选后的原生质体单细胞捕获分析,研制了腔室结构微流控芯片。建立芯片结构的数学模型,通过细胞捕获过程的仿真分析,确定芯片的内部结构尺寸;搭建微流控实验系统,进行聚苯乙烯微球及原生质体细胞的捕获实验,通过计算机显微拍摄计算得到其捕获效率平均为60%,证明利用腔室结构芯片实现单细胞捕获的可行性。研制的腔室结构微流控芯片具有大幅度减少试剂消耗、捕获速度快的特点,能够适用于30μm~60μm直径单细胞的捕获,并且可用于烟叶原生质体的细胞壁再生研究。
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