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土壤放线菌能够产生多种多样的具有生物活性的天然产物,是抗生素的重要来源。其中,安莎霉素类抗生素是一类以3-氨基-5-羟基苯甲酸(3-amino-5-hydroxybenzoic acid,AHBA)为起始单元的结构独特的大环内酰胺类化合物,具有良好的生物活性,故而从土壤放线菌中挖掘具有成药潜力的新型安莎霉素成为我们的研究目标。AHBA合酶是安莎霉素类化合物合成的关键酶,且AHBA合酶基因在不同的菌株中具有高度保守性,本课题组的宋任泰博士从全国各地的土壤中以AHBA合酶基因为靶向进行PCR筛选得到80株AHBA合酶基因阳性菌株。本研究论文以其中的三株AHBA阳性菌Streptomycessp.S051、Streptomyces sp.S006和Streptomycessp.S035为研究材料,对其次级代谢产物进行了系统的研究。运用葡聚糖凝胶(SephadexLH-20)、中压液相相柱层析(RP-18)、硅胶柱层析(Silica gel)以及高效液相色谱(HPLC)等多种技术,共分离得到了 29个化合物,并利用紫外(UV)、红外(IR)、质谱(MS)、核磁共振(NMR)和X-ray单晶衍射等技术鉴定了其结构,其中12个为新合物,包括1个萘醌类化合物,4个萜类化合物和7个五酮安莎霉素类化合物。对菌株Streptomycessp.S051的固体YMG培养基发酵产物进行提取分离和结构鉴定,共得到8个化合物,其中1个新的萘醌类化合物A13(4),未得到安莎霉素类抗生素,推测安莎霉素基因簇在此株菌中低表达或者不表达。对菌株Streptomyces sp.S006的固体Waksman培养基发酵产物进行提取分离和结构鉴定,共得到7个化合物,包括4个新的萜类化合物(B12、B13、B4和B6,12-15)并对其进行了抗菌活性的测定,化合物均未显示出明显活性。本次分离未得到安莎霉素类化合物,推测安莎霉素基因簇在此株菌中低表达或者不表达。对菌株Streptomyces sp.S035安莎霉素基因簇中的正调控因子LAL和SARP进行共表达构建了突变株S035-SL。对突变株Streptomyces sp.S035-SL的固体燕麦基发酵产物进行提取分离和结构鉴定,共得到14个化合物,包括7个结构新颖的五酮安莎霉素(SL31、SL27、SL14、SL6、SL8、SL12 和 SL13,16-22)。选取HeLa、SW480、PC3和HCT116四株癌细胞对化合物16-22进行了细胞毒性测定,其中化合物SL6、SL27和SL14均显示出了细胞毒作用,SL8和SL12对不同细胞株具有选择性抑制作用。