小窝蛋白-1通过P38MAPK信号链通路对大鼠机械通气所致肺损伤的保护机制研究

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目的:研究大鼠肺组织在不同潮气量机械通气的情况下小窝蛋白-1及P38MAPK表达的变化。方法56只雄性健康成年SD大鼠,体重220-330g,随机均分为7组:对照组(A组)正常呼吸,仅切开气管;实验对照组(B1组和B2组)进行不同通气时间的保护性机械通气,潮气量VT为6ml/kg,呼吸频率(RR)为60次/min,B1、B2组分别通气1h和2h;实验组(C1组和C2组)进行不同通气时间大潮气量机械通气,潮气量VT为30ml/kg,呼吸频率(RR)为40次/min,C1、C2组分别通气1h和2h;SB203580抑制剂处理组(D1组和D2组)进行大潮气量不同时间机械通气(VT为30ml/kg,RR为40次/min),D1组通气1h,D2组通气2h。机械通气前30分钟D组大鼠给予注射SB203580溶液,实验中7组大鼠均给予动脉血气和血流动力学监测,A组在切开气管后立即刻放血处死,剩余其他各组大鼠进行一定时间机械通气后放血处死,光镜下观察各组大鼠的肺组织病理学改变,进行DAD评分,用免疫组织化学染色法检测大鼠肺组织中caveolin-1、P38MAPK、及AP-1蛋白的表达,测定caveolin-1、P38MAPK、MKK3mRNA表达水平,测定肺湿干重比值(W/D)以及髓过氧化物酶(MPO)的活性,利用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白和Il-6的含量。结果与正常对照组A组比较,C1组和C2组的caveolin-1、P38MAPK蛋白及caveolin-1、P38MAPK、MKK3mRNA的表达上调, MPO、W/D比值、IL-6、总蛋白浓度含量和病理损伤评分升高,AP-1蛋白的表达下降。(P<0.05)。与B1组比较,C1组caveolin-1、P38MAPK蛋白及P38MAPK、caveolin-1、MKK3mRNA的表达上调, MPO、W/D比值、IL-6、总蛋白浓度含量和病理损伤评分升高,AP-1蛋白表达水平下降(P<0.05)。与B2组比较,C2组caveolin-1、P38MAPK蛋白及P38MAPK、caveolin-1、MKK3mRNA的表达上调, MPO、W/D比值、IL-6、总蛋白浓度含量和病理损伤评分升高,AP-1蛋白表达水平下降(P<0.05)。与C1组比较,D1组P38MAPK蛋白及P38MAPK、MKK3mRNA的表达下降,caveolin-1、AP-1蛋白及caveolin-1mRNA的表达上升, MPO、W/D比值、IL-6、总蛋白浓度含量和病理损伤评分升高(P<0.05)。与C2组比较,D2组P38MAPK蛋白及P38MAPK、MKK3mRNA的表达下降,caveolin-1、AP-1蛋白及caveolin-1mRNA的表达上升, MPO、W/D比值、IL-6、总蛋白浓度含量和病理损伤评分升高(P<0.05)。结论在大鼠机械通气模型中,小窝蛋白-1及P38MAPK信号链表达上调,参与了机械通气相关性肺损伤的保护性作用。
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