通过总结分析近年的中药复方配伍规律发现,中药活性成分间的药代动力学相互影响已有不少的报道,说明一种中药(或其中的某种成分)对其它中药(或其中的某种成分)的血浆浓度和组织分布存在较大的影响。甘草是最常用的中药,有十方九草之说,然而从甘草和其配伍中药的成分的血浆浓度和组织分布的影响进行甘草配伍的研究未见报道。本课题选择最常用的中药甘草的配伍为切入点,应用高效液相色谱法研究甘草的主要活性成分甘草次酸对中药活性成分山奈酚、橙皮素及槲皮素血浆浓度及其组织分布的影响来阐明甘草的配伍组方机理。这也是中药组方规律研究的一种有意义的新探索。研究内容主要包括下列几个部分。一、建立HPLC测定大鼠血浆及组织中山奈酚含量的方法,并应用于研究山奈酚与甘草次酸合用前后大鼠血浆及组织中山奈酚含量的变化。以SD大鼠为对象,灌胃给药后摘眼球取血,解剖摘取大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑组织。血浆样品在水浴中加盐酸水解,以乙腈为萃取剂,超声波辅助提取,利用高效液相色谱法测定血浆中山奈酚的浓度。色谱条件：流动相为甲醇-0.4%磷酸55：45(v/v),检测波长为370nnm,柱温为32℃。往组织中加入生理盐水制成组织匀浆液,用乙腈沉淀组织匀浆中的蛋白质,并在氮气流保护下吹干乙腈溶液,加流动相复溶后直接用高效液相色谱法测定山奈酚的含量。色谱条件：流动相为甲醇-0.4%磷酸45：55(v/v),检测波长为370nm,柱温为32℃。研究发现在高浓度服药时,甘草次酸的存在能快速在吸收阶段显著提高血浆的山奈酚浓度,表现了协同增强的作用。山奈酚单独用药在大鼠体内组织分布特征是C肝>C肾>C肺>C心,加入甘草次酸并未改变山奈酚在大鼠体的组织分布特征。二、建立HPLC测定大鼠橙皮素与甘草次酸配伍前后血浆及组织中橙皮素含量的方法,并用于甘草次酸对其血浆浓度和组织分布影响的研究。以SD大鼠为对象灌胃给药后摘眼球取血,解剖摘取大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑组织。血浆样品在水浴中加盐酸水解,以乙腈为萃取剂,超声波辅助提取,利用高效液相色谱法测定血浆中橙皮素的浓度。色谱条件：流动相为甲醇-0.4%磷酸52：48(v/v),检测波长为288nm,柱温为25℃。往组织中加入生理盐水,制成组织匀浆液,用乙腈沉淀组织匀浆中的蛋白质,并在氮气流保护下吹干乙腈溶液,加流动相复溶后直接用高效液相色谱法测定橙皮素的含量。色谱条件：流动相为甲醇-0.4%磷酸55：45(v/v),检测波长为288nm,柱温为32℃。研究发现橙皮素与甘草次酸同时服用时,橙皮素高浓度组在消除阶段的血药浓度有显著性增大。橙皮素单独用药在大鼠体内组织分布特征是C肝>C肾>C肺,加入甘草次酸并未改变橙皮素在大鼠体的组织分布特征。三、建立HPLC测定大鼠槲皮素与甘草次酸合用前后血浆及组织中槲皮素含量的方法,并用于甘草次酸对其血浆浓度和组织分布影响的研究。以SD大鼠为对象灌胃给药后摘眼球取血,解剖摘取大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑组织。血浆在水浴中加盐酸水解,以乙腈为萃取剂,超声波为辅助提取,利用高效液相色谱法测定血浆中槲皮素的浓度,流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液50：50(v/v),检测波长为370nm,流速为1.0mL/min,柱温箱控制在30℃,流动相经过0.45μmm薄膜过滤,进样量为20μL。往组织中加入生理盐水,制成组织匀浆液,用乙腈沉淀组织匀浆中的蛋白质,并在氮气流保护下吹干乙腈溶液,加流动相复解后直接用高效液相色谱法测定槲皮素的含量。组织样品分析的流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液52：48(v/v),柱温箱控制在32℃,流动相均经过0.45μm薄膜过滤,进样量为20μL。研究发现服药初期槲皮素在体内血浆浓度积累处于平衡,在消除相时期显出明显的浓度差。甘草次酸的存在能延迟槲皮素在肝脏中的分布吸收。