论文部分内容阅读
目的环境暴露因素和NAT2基因多态性对肾癌和膀胱癌患病风险的影响及相互作用。方法1.本课题采用根据性别、年龄±5岁1:1匹配的病例对照研究的方法。从2018年1月到2020年12月收集内蒙古自治区人民医院和内蒙古医科大学附属医院泌尿外科新确诊的151例肾癌和300例膀胱癌住院患者,对照选自以上两家三甲医院的体检中心的同期体检的健康人群,所有研究对象均已签署知情同意书。2.采用统一设计的调查问卷收集基线资料,内容包括:一般情况、职业史和既往史、生活习惯和环境状况等。通过病理检测报告收集研究对象的病理类型、病理分级、TNM临床分期及肿瘤远处转移的检查结果。3.收集所有研究对象的全血标本:采集EDTA抗凝血和惰性分离胶促凝血各2ml。4.基因分型检测:提取研究对象全血基因组DNA,设计PCR引物,对NAT2基因（rs1045278、rs1799930、rs1799931、rs973988）四个位点分别进行扩增并采用多重高温连接酶检测反应技术（im LDR）对以上四个位点进行SNP分型检测。5.酶联反应吸附测定法（ELISA）检测血清中NAT2蛋白水平:取100ml血清按照ELISA检测试剂盒说明书检测病例组和的对照组的NAT2的蛋白水平。6.统计学处理:所有数据应用IBM SPSS 25.0软件进行统计分析。连续型变量如年龄、身高等,用均数标准差或者中位数（四分位间距）表示,服从正态分布的资料比较用配对样本t检验,不服从正态分布的资料用秩和检验;分类变量如吸烟、饮酒等用例数（百分比）表示,组间比较用χ2检验,若n<40或理论频数小于5,用Fisher确切概率法。多因素分析采用条件logistics回归模型进行分析,计算比值比（odds ratios,ORs）及其相应的95%可信区间（confidence intervals,CIs）表示生活饮食习惯等基本环境因素以及基因多态性与肾癌和膀胱癌发病风险的关系。采用广义多因子降维法（generalized multifator dimensionality reduction,GMDR）分析NAT2基因多态性与膀胱癌和肾癌易感性的关系,并进行基因与环境交互作用分析。结果:1.膀胱癌的病例和对照之间性别、年龄、民族、BMI、饮用牛奶频率、烤肉、饮水量、空气清新剂差异无统计学意义（P（29）0.05）,两组之间文化程度、农药接触、工厂接触、吸烟、饮酒、口味咸淡、食用水果频率、饮食荤素、食用油、饮水种类、锻炼、染发、憋尿、燃料差异有统计学意义（P（27）0.05）。肾癌病例组和对照组之间性别、年龄、BMI、农药接触、工厂接触、吸烟、饮酒、口味咸淡、烤肉、染发、憋尿、空气清新剂差异无统计学意义（P（29）0.05）,食用水果频率、饮食荤素、食用油、牛奶频率、饮水种类、饮水量、锻炼、燃料差异有统计学意义（P（27）0.05）。2、膀胱癌的NAT2基因rs973988、rs1045278、rs1799930和rs1799931四个位点分布在病例组和对照组之间的基因型频率和等位基因频率在两组间差异没有统计学意义（P>0.05）。肾癌的NAT2基因rs973988、rs1045278、rs1799930和rs1799931四个位点分布在病例组和对照组之间的基因型频率和等位基因频率在两组间差异没有统计学意义（P>0.05）。3、条件Logistic回归方法显示,rs1799931AA/GA/GG、农药接触、吸烟、染发、憋尿均为膀胱癌的危险因素（OR值分别为2.117、2.353、3.914、2.200、2.034）,文化程度高、锻炼为膀胱癌的保护性因素（OR值分别为0.456、0.081）。食用动物油为肾癌的危险因素（OR值为3.103）。文化程度高、锻炼为肾癌的保护性因素（OR值分别为0.459、0201）。4、NAT2基因多态位点在膀胱癌中,rs973988等位基因频率在病理分级中差异有统计学意义（P值为0.036）,rs1799930等位基因频率在临床分期中差异有统计学意义（P值为0.043）。rs1045278、rs1799931位点等位基因和基因型频率在病理分级和临床分期中均无差异（P（29）0.05）。在肾癌中,位点rs973988等位基因和基因型频率分布在临床分期中的差异均有统计学意义（P值分别为0.001、0.009）。5、吸烟、缺乏锻炼、憋尿在膀胱癌的患病风险中存在潜在的环境-环境交互交互作用;缺乏锻炼与rs1799931位点在肾癌的患病风险中存在潜在的基因-环境交互作用。6、ELISA检测膀胱癌血清中NAT2基因蛋白浓度,病例组血清中NAT2蛋白浓度明显高于对照组,差异有统计学意义（P（27）0.001）。肾癌病例组血清中NAT2蛋白浓度明显高于对照组,差异有统计学意义（P（27）0.001）。结论:1.rs1799931AA/GA/GG、农药接触、吸烟、染发、憋尿均为膀胱癌的危险因素。食用动物油为肾癌的危险因素。文化程度高、锻炼为肾癌、膀胱癌的保护性因素。2.条件Logistic回归方法显示NAT2基因rs973988、rs1045278和rs1799930三个位点多态性与膀胱癌和肾癌患病不相关,rs1799931位点多态性与膀胱癌相关。3.NAT2基因多态位点在膀胱癌中,rs973988等位基因频率在病理分级中差异有统计学意义,rs1799930等位基因频率在临床分期中差异有统计学意义。在肾癌中,rs973988等位基因和基因型频率在临床分期中的差异均有统计学意义。4.缺乏锻炼、rs1799931之间在肾癌的发生中可能存在基因-环境交互作用。吸烟、缺乏锻炼、憋尿之间在膀胱癌的发生中可能存在环境-环境交互作用。5.血清中肾癌和膀胱癌NAT2基因蛋白表达量明显高于对照组。