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土壤化学屏障法(chemical soil barrier)作为一种有效的白蚁防治方法,被广泛应用于我国新建房屋的白蚁预防。联苯菊酯(bifenthrin),拟除虫菊酯类杀虫剂、杀螨剂,具有杀虫谱广、高效等特点,对白蚁有强烈的趋避及毒杀作用,是我国乃至世界最常使用的白蚁防治药剂之一。目前,虽有利用气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)等仪器检测联苯菊酯的方法见诸报道,但仪器方法使用成本昂贵且难以在实验室外的其他条件下应用与普及。为达到现场快速检测联苯菊酯的目的,本研究制备了抗联苯菊酯单克隆抗体并建立了 ic-ELISA方法和胶体金免疫层析试纸条,为土壤化学屏障中联苯菊酯的快速检测提供了可靠依据。本研究分别以联苯菊酸、联苯醇、联苯菊酯为原料合成半抗原GFd、LBc和LBs。采用活泼酯法将上述3种半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)偶联制备免疫原。采用混合酸酐法将包括LBy在内的4种半抗原分别与卵清蛋白(OVA)偶联制备包被原。利用紫外波长扫描法证实半抗原偶联成功,并测定了7种人工抗原的偶联结合比。通过免疫BALB/c小鼠、测定小鼠血清效价及细胞融合,筛选到一株能稳定分泌抗联苯菊酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3D4。经测定,细胞株3D4分泌的单克隆抗体为IgG1型,轻链为kappa链。利用制备的单克隆抗体建立了联苯菊酯ic-ELISA方法,并对抗原抗体和包被原的工作浓度、封闭物以及工作缓冲液等条件进行了优化。在最优条件下,得到标准曲线的线性方程为 B/Bo(%)=-0.3510LogC+0.0454,R2=0.9903,检测范围为 0.004-0.7 mg/L,IC50为0.05mg/L,IC10为0.004mg/L。抗体与其他联苯菊酯结构类似物的交叉反应率均小于0.7%,表明抗体对联苯菊醋具有较高的特异性。在黑土、黄土、红土中分别添加2-10 mg/kg的联苯菊酯标准品溶液,测得的平均回收率为83.5-104.7%,相对标准偏差为4.8-13.6%。利用建立的ic-ELISA方法对黄土真实样品中联苯菊酯含量进行检测,并与气相色谱的检测结果进行比较,得到相关性方程为y=1.0275x-0.2038,R2=0.9704,证明本研究建立的ic-ELISA方法具有较高的可靠性与准确性,可用于土壤化学屏障中联苯菊酯的检测。本研究制备了胶体金免疫层析试纸条,并对人工抗原、NC膜、胶体金颗粒、试纸条参数及工作溶液(盐离子强度、PEG 20000含量、甲醇含量、pH值等)进行了优化。结果表明,在最优条件下,试纸条对联苯菊酯的完全抑制浓度为60 mg/L。虽然其敏感性低于ic-ELISA,但在检测时间和操作步骤等方面则明显优于后者。大量研究表明,在抗原抗体相同的情况下,ELSIA敏感性通常高于试纸条,其原因是ELISA中存在酶标记物的反应信号放大效应。在试纸条检测中也可以通过银染增强等方法放大检测信号,提高检测的敏感性。