清热解毒、凉血通络方治疗大鼠系膜增生性肾小球肾炎的实验研究

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目的:在前期实验的基础上,观察清热解毒、凉血通络方对系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)模型大鼠血清肌酐(SCr)、血清白蛋白(ALB)和肾组织形态学的影响,同时检测肾组织中核因子-κB(NF-κB)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平,探讨清热解毒、凉血通络方治疗MsPGN的作用机制。方法:选取雄性SD大鼠为研究对象,采用隔日口服牛血清白蛋白(BSA)、尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B(SEB)、并皮下分点注射完全弗氏佐剂和不完全弗氏佐剂的方法制作大鼠MsPGN模型,并将大鼠随机分为空白组、模型组、清热解毒凉血通络方组和雷公藤多苷(TPG)组,以TPG作为对照,测定大鼠不同时期的SCr和血清ALB水平,光镜下观察肾组织形态学改变,以免疫组化法检测肾组织中NF-κB、Bcl-2和TNF-α的表达水平并进行相关病理分析。结果:1.模型组实验大鼠SCr较空白组升高(P<0.05),血清ALB显著下降(P<0.01),光镜下可见轻到中度系膜增生性病变,提示MsPGN造模成功。2.清热解毒、凉血通络方和TPG自造模后6周起即可不同程度改善血清ALB下降的水平,且二者疗效相近。3.清热解毒、凉血通络方和TPG于造模后8周才明显抑制实验大鼠SCr的升高,二者疗效相近。4.清热解毒、凉血通络方和TPG都有抑制GMC增生、ECM积聚的作用。5.清热解毒、凉血通络方和TPG均显著降低肾组织中NF-κB、Bcl-2和TNF-α的表达(P<0.01),二者之间无显著性差异(P>0.05)。说明在降低肾小球NF-κB、Bcl-2和TNF-α表达方面,清热解毒、凉血通络方和TPG作用显著,二者疗效相近。6.MsPGN大鼠肾组织中NF-κB的表达水平不仅与Bcl-2的表达水平呈显著正相关(P<0.01,γ=0.734),还与TNF-α的表达水平呈显著正相关(P<0.01,γ=0.729),提示三者密切相关,相互影响。7. MsPGN大鼠肾组织中NF-κB、Bcl-2和TNF-α表达水平的升高可能与GMC增生和ECM积聚的加重呈显著正相关,SCr随之逐步升高,血清ALB的水平逐步降低。结论:1.清热解毒、凉血通络方能够有效改善MsPGN大鼠血清ALB水平降低,抑制SCr水平升高。2.清热解毒、凉血通络方能够减轻GMC增生和ECM积聚。3.清热解毒、凉血通络方可能通过抑制肾组织中NF-κB、Bcl-2和TNF-α的表达,减轻GMC增生和ECM积聚,在MsPGN的治疗中与TPG效果相近。4.清热解毒、凉血通络方具有多靶点、多途径的整体治疗效应,在临床中具有良好的应用前景。
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