纳豆芽孢杆菌是从日本纳豆中分离的益生菌,属于枯草芽孢杆菌的亚种。其活菌制剂以及产生的代谢物质具有重要的生理功效而被广泛关注。肽聚糖是原核细胞壁的特殊成分,真核细胞不含肽聚糖,因此肽聚糖是真核免疫系统识别的理想靶标。肽聚糖识别分子可以诱导免疫调节物质的释放,从而起到免疫调节作用。为了探索纳豆芽孢杆菌胞壁肽聚糖免疫调节功能,本文研究了纳豆芽孢杆菌胞壁肽聚糖提取分离条件,初步分析了其理化性质和结构特征,研究其对小鼠免疫功能的影响,主要研究结果如下:1.优化纳豆芽孢杆菌细胞壁的提取条件以实验室保存的纳豆芽孢杆菌为研究材料,经增值培养,通过Box-Behnken试验设计和响应面分析确定超声辅助提取的最佳工艺参数为:超声波功率为314W,处理时间27min,OD600为0.66,在此条件下细胞壁最大提取得率为44.51%。2.纳豆芽孢杆菌细胞壁肽聚糖的制备及化学结构分析以得到的纳豆芽孢杆菌细胞壁为原料,经过三氯乙酸法,先后去除细胞壁中的磷壁酸、脂类物质、蛋白质,在经过透析,得到得率为8.5%的肽聚糖。通过溶菌酶实验、Bradford法、香醛法、苯酚-硫酸法、对肽聚糖组成成分进行分析。通过红外光谱和SDS-PAGE研究纳豆芽孢杆菌肽聚糖的结构。分析结果表明:糖总量为39.77%,蛋白质占54.47%,总脂质含量为4.5%。溶菌酶处理后,可溶性肽聚糖的分子量约为60kD。通过HPLC图谱分析,确定了溶解物的出峰时间与标准的肽聚糖溶解物出峰时间一致。其糖链结构由N-乙酰氨基葡萄糖和N-乙酰胞壁酸通过β-1,4-糖苷键连接而成。3.纳豆芽孢杆菌肽聚糖对小鼠免疫功能的影响挑选体质康健的昆明小鼠96只,体重18～22 g,随机分为空白对照组、肽聚糖溶液低、中、高剂量组,每组24只。饲养周期7d,每24h注射一次,检测不同剂量组对小鼠免疫指标及其细胞因子分泌量的变化情况。根据SPSS分析结果表明:纳豆芽孢杆菌肽聚糖可显着提高小鼠的免疫器官指数;肽聚糖可显著增加血清溶血素含量,小鼠碳清除指数和迟发型超敏反应,并对小鼠脾淋巴细胞的增殖及腹腔巨噬细胞吞噬能力均有增强效果;肽聚糖各剂量组均能提高巨噬细胞的代谢活力,极显著增加IL-2、IL-10、IFN-r、TNF-α的分泌量,提高NO和iNOS的表达量。