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中间锦鸡儿(Caragana intermedia)为豆科锦鸡儿属多年生灌木,根系发达,能适应干旱、盐碱等环境,在降水稀少、土壤贫瘠的恶劣条件下容易存活,对维持良好的生态环境起到重要的作用。R2R3-MYB作为成员最多的MYB类转录因子,参与了植物发育、物质代谢、细胞分化以及胁迫应答等众多生物学过程。纤维素合酶基因(CesA)是调控纤维素合成的关键基因,同时也参与一些逆境胁迫。目前关于中间锦鸡儿R2R3-MYB基因和CesA基因的研究较少,本研究从中间锦鸡儿干旱转录组数据库中筛选鉴定了 CiMYB基因家族并对部分成员进行了功能分析;此外,还对CiCesAs基因进行了克隆和功能分析:1.从中间锦鸡儿干旱转录组数据库中鉴定出40个包含R2R3结构域的CiMYB基因序列,其中29条序列具有完整ORF;ORF长度在700~1300bp之间,编码蛋白长度在200~400个氨基酸之间。30个CiMYBs分别被聚类到R2R3-MYB的14个不同的亚组中,余下的10个CiMYBs属于未分组R2R3-MYB。2.表达谱分析显示大部分CiMYBs基因响应干旱、ABA、NaCl、冷和紫外胁迫,且CiMYBs的表达具有一定的组织特异性,在茎、叶中的表达量更高。3.利用亚细胞定位软件在线预测到CiMYBs全部定位于细胞核中,但仅在12个CiMYBs预测到了核定位信号;进一步的亚细胞定位观察发现CiMYB15、CiMYB74和CiMYB116定位在细胞核中。4.CiMYB15基因的表达受紫外胁迫诱导;启动子序列中主要包含损伤诱导元件G-box和P-box、盐诱导作用元件GT1-motif、参与干旱诱导的反应元件MBS,以及真菌侵害应答元件BOX-W1、植物-病原菌互作元件EIER;此外,还包含调节黄酮合成基因的MYB转录因子的结合位点;转CiMYB15基因的拟南芥总黄酮含量高于野生型,并且AtCHS基因表达上调。5.CiMYB74启动子主要包含茉莉酸响应基序(CGTCA-motif和TGACG-motif)、ABA及病毒应答元件(CE3)、厌氧诱导响应元件(ARE)以及响应节律振荡元件(Circadian)等;CiMYB74在拟南芥中过表达后,降低了植物在种子萌发时期对于NaCl的耐受性,SOS1、SOS2、SOS3以及HKT基因表达轻微下调。6.CiMYB116基因启动子主要包含热应答元件、水杨酸应答元件、防卫反应及胁迫应答元件;过表达CiMYB116基因降低转基因植物在种子萌发时期对于ABA的敏感性。7.中间锦鸡儿CiCesA8基因在植物各器官广泛表达,且在干旱、ABA和BR处理后表达下调。转CiCesA8基因的拟南芥在种子萌发时期对ABA更加敏感,并且对干旱胁迫的耐受性降低,ABA和胁迫相关基因表达下调;CiCesA8能恢复AtCesA8突变体lew2-1植株矮小的表型。