基于ID2/E2A信号轴与PD-1受体探讨中药益艾康胶囊治疗艾滋病的作用机制

来源 :河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cnars
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目的:本研究通过观察健康人、HIV/AIDS无证可辨者、HIV/AIDS肺脾气虚证患者CD8+T、CD4+T相关免疫指标、ID2/E2A、PD-1等基因及细胞因子等的表达情况,探讨免疫指标、基因与免疫平衡的相互作用,揭示健脾益气中药益艾康胶囊对HIV/AIDS肺脾气虚证患者的免疫调控作用机制。方法:在抗慢性病毒感染的关键CD8+T细胞亚群CXCR5+CD8+T细胞及其重要调控因子ID2/E2A,以及PD-1与HIV感染具有相关性的基础上,本课题纳入受试者60例,HIV/AIDS肺脾气虚组、HIV/AIDS无证可辨组、健康人组各20例,采用Real Time-PCR、ELISA等方法,观察健康人组、HIV/AIDS无证可辨组、HIV/AIDS肺脾气虚证组相关免疫指标、基因的表达情况,探讨这些免疫指标、基因与免疫平衡的相互作用,探索益艾康胶囊对HIV/AIDS患者免疫调控作用机制。为中医药的标准化规范化治疗提供依据。结果:1、病例完成情况:本课题共纳入受试者60例,HIV/AIDS肺脾气虚组、HIV/AIDS无证可辨组、健康人组各20例。实际完成60例。2、中医主要症状积分:肺脾气虚组治疗前后的主要症状总积分分别为20.10±7.07和14.55±8.78,差异有统计学意义(P<0.05);其中治疗前后“易感冒”积分分别为3.40±4.73和1.60±3.02;治疗前后“自汗”积分分别为2.40±3.02和0.90±1.41;治疗前后“泄泻”积分分别为2.10±2.40和1.05±1.47,差异均有统计学意义(P<0.05)。3、舌脉积分:肺脾气虚组治疗前后舌象积分分别为0.90±0.31和0.90±0.00,差异无统计学意义(P>0.05);治疗前后脉象积分分别为0.85±0.37和0.85±0.37,差异无统计学意义(P>0.05)。4、生存质量:治疗前,肺脾气虚组与无证可辨组生存质量总积分分别为81.2±8.39,88.5±6.01,差异有统计学意义(P<0.05);其中“社会关系领域”积分分别为14.3±1.66,14.9±1.94;“独立性领域”积分分别为12.4±2.26,14.7±1.66,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺脾气虚组治疗后生存质量的总积分为80.1±5.30,组内比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后“社会关系领域”积分为12.9±1.00,组内比较差异有统计学意义(P<0.05)。5、T淋巴细胞亚群影响(CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+比值)CD4+T淋巴细胞:入组前,健康人组、无证可辨组及肺脾气虚组CD4+T淋巴细胞计数分别为626.16±147.26个/μl、691.30±227.36个/μl、507.50±173.59个/μl,差异有统计学意义(P<0.05);肺脾气虚组治疗前后CD4+T淋巴细胞计数分别为483.45(425.37,591.00)个/μl、623.25(487.87,748.67)个/μl,差异有统计学意义(P<0.05)。CD8+T淋巴细胞:入组前,健康人组、无证可辨组及肺脾气虚组CD8+T淋巴细胞计数分别为680.94±213.30个/μl、815.20±287.56个/μl、571.13±228.08个/μl,差异有统计学意义(P<0.05);肺脾气虚组治疗前后CD8+T淋巴细胞分别为:596.45(395.75,726.40)个/μl、689.90(449.30,992.07)个/μl,差异无统计学意义(P>0.05)。CD4+/CD8+比值:入组前,健康人组、无证可辨组及肺脾气虚组CD4+/CD8+比值分别为0.97±0.29、0.93±0.35、0.99±0.40,差异无统计学意义(P>0.05);肺脾气虚组出组时CD4+/CD8+比值为0.97±0.43,组内比较差异无统计学差异(P>0.05)。6、PD-1、ID2/E2Am RNA、CXCR5+CD4+T、CXCR5+CD8+T相关指标结果分析PD-1m RNA:入组前,健康人组、无证可辨组及肺脾气虚组PD-1m RNA的ΔCT值分别为11.49±3.30、12.24±3.08、12.79±2.21,差异无统计学差异(P>0.05);肺脾气虚组出组时PD-1m RNA的ΔCT值为17.91±3.19,组内比较差异有统计学意义(P<0.001)。外周血中CD4+T淋巴细胞的PD-1的表达水平:入组前,健康人组、无证可辨组及肺脾气虚组CD4+T淋巴细胞表面PD-1的表达水平分别为6.32(5.60,7.60)、8.43(6.38,13.20)、11.40(4.97,17.35),差异有统计学意义(P<0.05);肺脾气虚组治疗前后,PD-1在CD4+T淋巴细胞表面表达水平分别为12.33±8.01、14.22±7.11,差异无统计学意义(P>0.05)。外周血中CD8+T淋巴细胞的PD-1的表达水平:入组前,健康人组、无证可辨组及肺脾气虚组CD8+T淋巴细胞表面PD-1的表达水平分别为2.62(1.78,3.53)、5.38(2.97,8.40)、6.50(4.80,10.70),差异有统计学意义(P<0.001);肺脾气虚组治疗前后,PD-1在CD8+T淋巴细胞表面表达水平分别为7.59±3.72、7.06±4.36,差异无统计学意义(P>0.05)。ID2 m RNA:入组前,健康人组、无证可辨组及肺脾气虚组ID2 m RNA的ΔCT值分别为-1.19(-3.33,-0.41)、-6.21(-7.54,-5.01)、-4.51(-4.97,-3.79),差异有统计学意义(P<0.001);肺脾气虚组在治疗前后ID2 m RNA的ΔCT值分别为-4.42±0.88、-0.65±1.49,差异有统计学意义(P<0.001)。E2Am RNA:入组前,健康人组、无证可辨组及肺脾气虚组E2Am RNA的ΔCT值分别为6.65±2.86、3.10±4.42、3.51±2.39,差异有统计学意义(P<0.05);肺脾气虚组出组时E2A m RNA的ΔCT值为10.41±2.73,组内比较差异有统计学意义(P<0.001)。CD4+T淋巴细胞表面辅助受体CXCR5+表达水平:入组前,健康人组、无证可辨组及肺脾气虚组CD4+T淋巴细胞表面辅助受体CXCR5+计数分别为9.47±6.81、22.46±13.78、19.56±12.44,差异有统计学意义(P<0.001);肺脾气虚组治疗后CD4+T淋巴细胞表面辅助受体CXCR5+计数为30.17±13.51,组内比较差异有统计学意义(P<0.05)。CD8+T淋巴细胞表面辅助受体CXCR5+表达水平:入组前,健康人组、无证可辨组及肺脾气虚组CD8+T淋巴细胞表面辅助受体CXCR5+表达水平分别为1.39(0.96,1.76)、1.75(1.24,3.16)、2.07(1.10,2.65),差异无统计学差异(P>0.05);肺脾气虚组治疗前后,CD8+T淋巴细胞表面辅助受体CXCR5+表达水平分别为2.15±1.34、22.72±11.66,差异有统计学意义(P<0.001)。7、安全性指标:在0、6月时分别检测受试者血常规、肝肾功等安全性指标,结果均未见明显异常。结论:本研究通过6个月的临床观察,为益艾康胶囊对研究结果进行分析比较,初步得出以下结论:1、益艾康胶囊可以显著提升HIV感染者CD4+T淋巴细胞计数、改善CD4+/CD8+比值,说明益艾康胶囊可改善HIV感染者免疫功能;并且改善HIV感染者(肺脾气虚证)的相关症状;2、益艾康胶囊可以明显降低PD-1、ID2、E2Am RNA表达水平,表明其改善机体免疫功能的机制可能是通过阻断PD-1、ID2/E2Am RNA信号通路,进而善机体免疫功能;3、益艾康胶囊可以明显提高HIV感染者体内CD4+T、CD8+T淋巴细胞表面辅助受体CXCR5细胞亚群的数量和功能,改善免疫微环境。
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