【摘 要】
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视网膜母细胞瘤是最常见的儿童眼内恶性肿瘤。目前的治疗方式有直接摘除眼球及剜出眼眶内容物、化学减容法、激光光凝、温热疗法、冷冻疗法、外照放疗等。基因治疗尚处于研究
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视网膜母细胞瘤是最常见的儿童眼内恶性肿瘤。目前的治疗方式有直接摘除眼球及剜出眼眶内容物、化学减容法、激光光凝、温热疗法、冷冻疗法、外照放疗等。基因治疗尚处于研究阶段。微泡造影剂作为一种新型的基因转移载体,在声像图的监控下进行超声辐照,微泡能够在指定部位“爆破”,释放所携带的基因。本文通过体外实验研究超声微泡造影剂携带EGFP基因对视网膜母细胞瘤细胞进行转染的效率及探讨最适转染条件。全文分为三个部分,依次对微泡造影剂及超声对体外培养的RB细胞生长活性的影响、微泡携带EGFP基因转染RB细胞的最适声强时间条件、以微泡为基因载体与传统转染方法的转染效率对比作了研究。第一部分检测了微泡造影剂和超声对体外培养的RB细胞生长活性的影响。将培养的RB细胞分为9组,其中5组分别予以超声条件为0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 1.25 W/ cm~2声强,作用时间均为60 s的连续波照射。另4组RB细胞分别予以1%, 10%, 20%,30%的浓度梯度的微泡造影剂。用0.4%台盼蓝直接染色10 min,显微镜观察,计数被染色(死)细胞和拒染(活)细胞。染色结果显示:当超声强度为0.25、0.5及0.75 W/cm~2,时间60 s时,细胞存活率均>95%;当超声强度为1.0及1.25 W/cm~2,
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