前列腺素E2对钛金属表面混合生物膜形成的影响

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[目的]1.构建钛金属(Titanium,Ti)表面细菌-真菌混合生物膜(Polymicrobial Biofilms,PBF)体外模型,研究钛金属表面混合生物膜生长特点。2.探索前列腺素E2 (Prostaglandin E2, PGE2)对钛金属表面白色念珠菌-表皮葡萄球菌混合生物膜形成的影响。[方法]1.构建钛金属表面白色念珠菌(Candida albicans,CA)-表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermide,SE)混合生物膜体外模型,分为白念组、表葡组与混合组,选用钛金属作为实验材料,将钛金属至于各组菌液中培养6h、12h、24h、48h、72h,取出钛金属并通过结晶紫(Crystal violet,CV)染色、XTT、激光共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)、扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)等方法研究混合培养对生物膜形成的影响。2.分别在白色念珠菌-表皮葡萄球菌混合菌液中加入50pg/ml、100pg/ml、200pg/ml、400pg/ml浓度的PGE2,在放入钛金属培养24h后取出钛金属片,并通过结晶紫染色、XTT、CLSM、SEM等方法研究不同浓度PGE2对于白色念珠菌-表皮葡萄球菌混合生物膜形成的影响[结果]1.结晶紫、XTT检测发现混合组生物膜形成能力及生长动力高于单菌种组。2.随培养时间增加,生物膜厚度增厚、结构复杂化,可见表皮葡萄球菌和白色念珠菌的孢子、菌丝重叠、混杂生长,白色念珠菌周围黏附大量表皮葡萄球菌,形成复杂网状结构。3. PGE2对混合生物膜形成的影响与浓度相关。不同浓度PGE2对混合生物膜的促进能力依次为 200pg/ml、100pg/ml、400pg/ml、50pg/ml。4.加入PGE2后,混合生物膜形态无明显变化,但可见混合生物膜中白色念珠菌菌丝增多,表皮葡萄球菌数量及粘附增加。[结论]1.钛金属表面细菌-真菌混合生物膜较单一菌种生物膜生长快,结构复杂。2. PGE2可以促进细菌-真菌混合生物膜形成,且促进效果随PGE2浓度相关。
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