黄羽肉鸡FATP1的分子克隆与表达

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脂肪组织在动物机体不同部位的沉积是影响胴体品质的重要因素。脂肪酸跨膜转运是禽类脂肪沉积的重要前提。脂肪酸转运蛋白1(fatty acid transport protein-1,FATP1)是参与脂肪酸跨膜转运的重要载体蛋白之一。为研究鸡FATP1的cDNA结构特征,探讨该基因mRNA的表达特点,本试验选用22、29、42和56d黄羽肉鸡公鸡和母鸡各6羽,采集胸肌、腿肌、皮下脂肪和腹脂组织样品,运用cDNA末端快速扩增(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE)技术克隆得到鸡FATP1序列(GenBank:DQ352834),同时采用荧光定量PCR方法检测FATP1 mRNA的组织特异性分布与发育性表达。 研究结果如下: 1.利用RACE方法克隆得到一段2488bp的鸡FATP1基因cDNA序列,GenBank收录号为DQ352834,结构分析表明,该片断包括鸡FATP1基因的全部编码区和poly(A)信号,其中3非翻译区(Untranslated Region,UTR)547 bp,开放阅读框(OpenReading Frame,ORF)1941 bp。 2.应用生物信息软件分析,结果表明,鸡FATP1基因编码的蛋白序列为646个氨基酸残基,鸡与人和鼠的FATP1氨基酸序列同源性分别为83.9%和83.0%。鸡FATP1基因编码蛋白还具有AMP结合蛋白家族和脂酰基辅酶A合成酶的典型结构。 3.鸡FATP1 mRNA在许多组织中都有表达,尤其是在脂肪组织、骨骼肌、下丘脑、睾丸、法氏囊等组织中表达较高。 4.采用实时荧光定量RT-PCR检测FATP1 mRNA在胸肌、腿肌、腹脂和皮下脂肪中的发育性表达,结果表明:公鸡胸肌和皮下脂肪FATP1 mRNA的表达在不同日龄之间差异不显著,公鸡腿肌和腹脂FATP1 mRNA的表达量在42日龄时显著高于其他日龄(P<0.05)。母鸡胸肌和腿肌的FATP1 mRNA的表达量在42日龄时显著高于其它日龄,而皮下脂肪和腹脂的FATP1 mRNA表达量显著低于其他日龄(P<0.05)。同一日龄时,公鸡和母鸡的腿肌表达量均高于胸肌。
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