急性髓系白血病中医证型的临床特征分布及与Dkk-3基因甲基化研究

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目的:1.研究急性髓系白血病(AML)中医证型与各临床特征之间的分布关系;2.检测AML患者骨髓细胞中Dickkopf-3(Dkk-3)基因甲基化的阳性率,并进一步研究AML中医证型与Dkk-3基因甲基化的分布关系,以探讨DNA甲基化在AML发生发展中的作用,并为AML中医证型与生物学标志物的研究提供参考依据。方法:1.收集93例初诊AML(非M3)患者的相关临床特征资料,包括性别、年龄、FAB分型、骨髓原始细胞比例、血常规(WBC、HGB、PLT)、甲基化相关基因TET2和DNMT3A的突变情况,并将所有患者进行中医分型,探讨中医证型与上述临床特征之间的分布关系,结果采用SPSS 26.0软件进行统计学分析;2.收集45例初诊为AML(非M3)的患者作为病例组,21例非恶性血液病患者作为对照组,两组抽取骨髓标本后常规提取DNA并用亚硫酸氢盐处理,然后用PCR扩增目标序列,采用焦磷酸测序法(Pyrosequencing法)检测两组Dkk-3基因甲基化的阳性率,进一步分析病例组不同中医证型与Dkk-3甲基化的分布规律,结果采用SPSS 26.0软件进行统计学分析。结果:1.93例AML患者中,中医证型分布与性别、FAB分型无统计学意义(P>0.05);中医证型分布与年龄、骨髓原始细胞比例、血常规、TET2基因突变和DNMT3A基因突变均存在统计学意义(P<0.05)。2.病例组与对照组的Dkk-3基因甲基化阳性率有显著差异(P<0.01),病例组为51.1%,对照组为0,两组性别、年龄无统计学意义(P>0.05);病例组中医证型分布与性别无关(P>0.05),但与年龄有关(P<0.05);病例组不同中医证型Dkk-3甲基化阳性率差异有统计学意义(P<0.05);病例组实证证型与虚证证型的甲基化阳性率有显著差异(P<0.01),实证证型为73%,虚证证型为21%。结论:1.相比气阴两虚型和瘀血痰结型,毒热炽盛型患者的年龄更小、骨髓原始细胞比例更高、TET2和DNMT3A基因突变率更高;毒热炽盛型和瘀血痰结型的WBC计数比气阴两虚型更高;瘀血痰结型的HGB和PLT比毒热炽盛型和气阴两虚型更高。2.Dkk-3基因在AML患者中存在高甲基化率,在非恶性血液病患者中不发生甲基化;AML患者中医证型分布与年龄有关,毒热炽盛型最小,气阴两虚型最大;不同中医证型的Dkk-3基因甲基化率有差异,瘀血痰结型和毒热炽盛型的甲基化率均高于气阴两虚型;实证证型的Dkk-3基因甲基化率显著高于虚证证型。
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