【摘 要】
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白细胞介素（Interleukin,IL）是由一类具有生物活性的细胞因子,来源于多种细胞,在机体免疫系统、信息传递以及炎症中占据重要地位。因此,建立IL的免疫学检测方法具有十分重要的意义。本课题目的在于建立小鼠IL-18、IL-10的高灵敏度和特异性的双抗体夹心ELISA。本工作取得的具体结果如下:（1）通过大肠杆菌表达系统,我们获得了小鼠IL-18蛋白。通过单克隆抗体制备技术,我们获得6株单抗克
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白细胞介素（Interleukin,IL）是由一类具有生物活性的细胞因子,来源于多种细胞,在机体免疫系统、信息传递以及炎症中占据重要地位。因此,建立IL的免疫学检测方法具有十分重要的意义。本课题目的在于建立小鼠IL-18、IL-10的高灵敏度和特异性的双抗体夹心ELISA。本工作取得的具体结果如下:（1）通过大肠杆菌表达系统,我们获得了小鼠IL-18蛋白。通过单克隆抗体制备技术,我们获得6株单抗克隆抗体4G4、3G11、4C4、3E8、4E6和4A10。通过抗体配对试验,我们将单抗4E6、4G4分别作为捕获抗体和检测抗体,建立了小鼠IL-18的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,本检测方法的检测限为17.7pg/mL（2σ）,检测范围为40-1400pg/mL。本方法还具有良好的特异性（不与小鼠IL-10、IL-1β、IL-17A、IL-2、IL-6和IFN-γ发生反应）。（2）本实验在实验室前期获得的8株小鼠IL-10杂交瘤细胞的基础上展开工作。我们通过交叉反应实验成功获得6株针对小鼠IL-10的杂交瘤细胞株（1F3、4E3、2E3、3D8、4F9、1F9）。通过单克隆抗体制备技术,我们获得了5株单克隆抗体4E3、1F3、2E3、3D8和4F9。通过抗体配对试验,我们将单抗3D8、4F9分别作为捕获抗体和检测抗体,建立了小鼠IL-10的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,本检测方法的检测限为61.3ng/mL（2σ）,检测范围为0.08-2.56μg/mL。该检测限与商业试剂盒水平具有一定的差距。
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