转运体是一类介导分子或离子跨膜转运的蛋白，包括内源性物质转运体（如神经递质转运体、氨基酸转运体、葡萄糖转运体等）和外源性物质转运体（如药物转运体）。有机阴离子转运多肽（Organic anion transporting polepeptides，OATPs）是一类重要的药物转运体，人OATP超家族由6个家族共11个成员组成。其中OATP1B3是OATP1家族中重要的成员之一，在正常生理条件下特异性地表达在人体肝脏细胞上，可以介导雌酮-3-硫酸（Estrone-3-sulfate，E3S）、硫酸脱氢表雄酮睾酮（Dehydroepiandroserone sulfate，DHEAS）、雌二醇-17β-葡萄糖醛酸（Estradiol-17β-glucuronide，E17βG）等内源性化合物和药物的摄取。　　糖基化是发生在蛋白质翻译后的一种修饰方式，在膜蛋白及分泌蛋白中普遍存在，很多转运体也存在糖基化修饰。糖基化作为一种重要的翻译后修饰对蛋白质功能有着重要影响。然而，转运体OATP1B3是否发生了糖基化、哪些位点发生了糖基化修饰以及糖基化对转运体功能和表达的影响并未有相关文献报道。本实验成功构建了去N-糖基化位点突变的OATP1B3质粒，建立了OATP1B3表达体系和摄取实验体系来探究N-糖基化对OATP1B3表达及功能的影响。实验结果表明OATP1B3存在五个N-糖基化位点，分别为N134、N151、N445、N503和N516。这些位点突变后，OATP1B3膜表达水平和转运活性均显著性降低，其中N134和N151对OATP1B3的表达和功能发挥着重要作用。当五个位点同时突变后，膜表达和转运功能几乎完全丧失。这些结果表明N-糖基化对OATP1B3的表达和功能非常重要。　　肝脏是人体内的重要代谢器官，OATP1B3特异性地表达在肝细胞膜上并可转运结构各异的内外源性底物，因此 OATP1B3发生药物-药物和药物-食物相互作用的潜在靶点。天然产物如黄酮类化合物在食物中广泛存在，为了减少潜在的OATP1B3介导的药物相互作用的不良反应，本文就天然化合物对OATP1B3功能的影响进行了研究。结果发现槲皮素、槲皮甙、菊花梗叶黄酮、桑皮黄素、甘草次酸和甘草酸对OATP1B3介导的荧光素甲氨蝶呤（Fluorescein methotrexate，FMTX）的摄取具有明显的抑制作用，其IC50值分别为10.1μM、9.0μM、4.1μg/ml、3.6μM、3.8μM和7.5μM。　　本文两部分课题的研究使我们对转运体OATP1B3的表达和功能有了进一步的认识，同时也为 OATP1B3结构与功能相互关系的研究奠定基础。天然化合物中OATP1B3新的抑制剂的发现提醒我们，当服用OATP1B3相关的底物药物时，应该注意避免与这些抑制剂同时服用，以避免不良药物相互作用的发生。