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近年来,随着我国经济的不断发展和人们饮食结构的改变,现代化畜禽养殖场的数量也随之不断增多。这些养殖场的主要养殖模式是集约化和工厂化。养殖过程中抗生素的使用频率和总量也迅速攀升,由此诱导产生的抗生素耐药菌对生态环境以及人类健康都造成了巨大的威胁。本课题针对其中一种典型的抗生素耐药菌—金黄色葡萄球菌展开研究。课题采集了北京、河北、黑龙江地区养殖场工人鼻腔、社区人员鼻腔样本及养殖场动物粪便样本。通过K-B药敏纸片法对分离出的金黄色葡萄球菌进行了17种抗生素的耐药性试验,并运用金葡菌蛋白A基因多态性分型(Spa分型)和多位点序列分析(MLST分型)方法对金黄色葡萄球菌进行遗传分型研究。研究主要结论如下:(1)经系统的筛选鉴定后,从养殖场工人鼻腔和养殖场动物粪便、社区人员鼻腔样本中共筛选出48株金黄色葡萄球菌。从养殖场工人鼻腔样本中分离出33株,其中鸡场工人鼻腔中19株、猪场工人鼻腔中10株、鸽场工人鼻腔中4株;粪便样本中分离出4株,其中牛粪、鸡粪各2株;社区人员鼻腔样本分离出11株。从养殖场工人鼻腔和养殖场动物粪便、社区人员鼻腔样本中共筛选出28株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。从养殖场工人鼻腔样本中分离出24株,其中鸡场工人鼻腔中18株、猪场工人鼻腔中4株、鸽场工人鼻腔中2株;粪便样本中分离出4株,其中牛粪、鸡粪各2株。(2)本课题所分离到的金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌都对氨苄西林完全耐药;都对青霉素、链霉素、红霉素、环丙沙星、诺氟沙星、四环素、克林霉素高度耐药且耐药率在90%以上;都对强力霉素有相对较高的耐药性耐药率在40%以上;都对头孢哌酮、庆大霉素有一定的耐药性耐药率在25%以下;都对磺胺甲恶唑、氯霉素高度敏感,都对阿米卡星、万古霉素、利福平完全敏感。金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌都对β-内酰胺类、大环内酯类、喹诺酮类、四环素类、林可霉素类抗生素表现出较高的耐药性;都对氨基糖苷类、磺胺类、氯霉素类抗生素的敏感性较高;都对多肽类、利福霉素类抗生素完全敏感。且整体上,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对不同种类抗生素的耐药性要高于金黄色葡萄球菌。(3)Spa分型共检测出3种spa型,包括t034、t899、t011。在鸡场工人鼻腔、社区人员鼻腔、牛粪、鸡粪中分离的金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的spa型均为t034;在猪场工人鼻腔中分离的金黄色葡萄球菌t899的比例为90.91%、t034的比例为9.09%、而MRSA均为t899;在鸽场工人鼻腔中分离的金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的spa型均为t011。分离出的金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的spa型与其对17种抗生素的耐药性有一定的相关性。MLST分型共检测出5种ST型,包括ST398、ST5、ST59、ST10、ST9。在鸡场工人鼻腔中分离的金黄色葡萄球菌中ST398的比例为52.63%、ST5的比例为15.79%、ST59的比例为10.53%、ST10的比例为21.05%、在鸡场工人鼻腔中分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中ST398的比例为50%、ST5比例为16.67%、ST59的比例为11.11%、ST10的比例为22.22%;在猪场工人鼻腔中分离的金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌均为ST9;鸽场工人鼻腔中分离的金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌均为ST398;在社区人员鼻腔中分离的金黄色葡萄球菌中ST398的比例为81.82%、ST59的比例为18.18%;牛粪、鸡粪分离的金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌均为ST398。分离出的金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的ST型与其对17种抗生素的耐药性有一定的相关性。本研究结果可以为评估养殖环境中金黄色葡萄球菌对周围人类及环境的危害及制定相应的控制措施提供现实依据。