XPF小干扰RNA对子宫内膜癌Ishikawa细胞卡铂敏感性的影响

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sjtwwf
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
子宫内膜癌是女性生殖系统常见肿瘤之一,居妇科常见恶性肿瘤的第3位。子宫内膜癌治疗一般是以手术为主,辅助放疗及化疗等方法。在对子宫内膜癌患者进行化疗的过程中,常会有这样的病例出现,不同的子宫内膜癌患者,尽管她们的肿瘤具有相同的TNM分期、相同的组织病理类型及相同的细胞分化程度,采用了相同的化疗方案,但预后却大相径庭。本研究针对着色性干皮病基因组F (Xeroderma Pigmentosum group F, XPF)基因设计合成小干扰RNA(small interference RNA, siRNA),在脂质体介导下转染人子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞,以降低子宫内膜癌细胞XPF的基因表达水平,减少ERCC1-XPF复合体的形成,从而减弱子宫内膜癌细胞DNA的修复功能,抑制子宫内膜癌细胞的增殖,提高子宫内膜癌细胞对铂类化疗药物的敏感性,降低其对铂类药物的耐药性。目的:本研究旨在探讨利用小干扰RNA沉默XPF基因后,对子宫内膜癌Ishikawa细胞卡铂敏感性的影响,为逆转子宫内膜癌铂类耐药寻找新的靶点和方法提供实验依据。方法:利用化学方法合成2条针对XPF的小分子RNA (XPF-siRNA1和XPF-siRNA2),利用脂质体将XPF-siRNA转染Ishikawa细胞后,运用RT-PCR法检测Ishikawa细胞XPF mRNA水平变化;Western Blot法检测XPF蛋白表达水平的变化;MTT实验检测RNA干扰后Ishikawa细胞对卡铂敏感性的变化,计算XPF-siRNA转染Ishikawa细胞后在卡铂刺激下半数抑制浓度(Inhibitant concentration50,IC50)的变化。结果: XPF-siRNA1及XPF-siRNA2转染Ishikawa细胞后,在倒置荧光显微镜下可见明亮的绿色荧光。XPF-siRNA1及XPF-siRNA2转染组XPF mRNA相对水平明显低于Neg-siRNA对照组;XPF蛋白相对表达水平明显低于Neg-siRNA对照组(p<0.05)。MTT实验结果表明,转染XPF-siRNA后,各组子宫内膜癌Ishikawa细胞在卡铂刺激下,细胞增殖抑制率有明显变化,XPF-siRNA1转染组为88.1%,XPF-siRNA2转染组为81.5%,而Neg-siRNA转染组为49.7%。IC50值在Neg-siRNA转染组为180.0±7.2μmol/L,XPF-siRNA1转染组为92.8±6.4μmol/L,XPF-siRNA2转染组为101.5±4.9μmol/L。XPF-siRNA1和XPF-siRNA2转染组IC50与Neg-siRNA转染组相比明显下降(p<0.05)。结论:本实验合成的XPF-siRNA1和XPF-siRNA2能有效降低子宫内膜癌Ishikawa细胞XPF mRNA水平及XPF蛋白的表达;转染XPF-siRNA1和XPF-siRNA2后,在等量的卡铂药物作用下,子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖抑制率明显增高,且卡铂对Ishikawa细胞的IC50降低,说明Ishikawa细胞对卡铂的敏感性增强;XPF表达水平的降低,减少了ERCC1-XPF复合体的形成,减弱了子宫内膜癌细胞DNA的修复功能,从而提高了子宫内膜癌细胞对铂类化疗药物的敏感性,降低其对铂类药物的耐药性。
其他文献
戏班是民间戏曲艺人组成的演出团体,由于社会条件、经济条件的制约和艺人心理因素影响,形成了许多特殊的习俗。本文对江淮嗨子戏戏班习俗中的演出习俗进行了调查整理,以期对
明廷派出御史巡按地方,在地方监察体系中有不可或缺的地位。考察地方官是巡按御史发挥监督作用的重要途径,其对地方官员的考察包括朝觐、定期和不时考察,考察的方式也多种多
<正>胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在东亚地区居高不下,而且病死率目前仍然在世界范围内位居第二[1]。其中,我国胃癌的发病率和病死率分别为35.02/10万和36
  在后危机时代,中俄两国面临如下基本问题:在国际环境不断变化下如何实际而有效地发展国民经济?如何避免经济陷阱?国家在全球经济中的地位?如何改进这种地位?回答这些问题从中俄
从境外仲裁机构的分支机构的市场准入、分支机构与“仲裁委员会”的属性、法院对分支机构的监管以及分支机构的裁决认定、承认与执行等方面,分析了境外仲裁机构在中国内地开展
针对目前我国精神障碍患者的康复治疗模式存在的缺陷、精神障碍患者愈后社会地位不高、难以真正回归社会等问题做了初步探讨,分析了影响精神障碍患者愈后社会地位的因素、社
精神健康社会工作是指社会工作者综合运用精神卫生、社会工作专业知识和方法,为有需要的精神障碍患者、家庭提供专业服务,帮助其舒缓、解决和预防因精神障碍引起的心理、情绪等
表达方式的运用,包括记叙、描写、说明、抒情、议论五种。高考考纲,有关写作“表达运用”考试层级为E,定位为最高考查级别。并具体说明:要求在作文中思想健康,感情真挚,即考