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子宫内膜癌是女性生殖系统常见肿瘤之一,居妇科常见恶性肿瘤的第3位。子宫内膜癌治疗一般是以手术为主,辅助放疗及化疗等方法。在对子宫内膜癌患者进行化疗的过程中,常会有这样的病例出现,不同的子宫内膜癌患者,尽管她们的肿瘤具有相同的TNM分期、相同的组织病理类型及相同的细胞分化程度,采用了相同的化疗方案,但预后却大相径庭。本研究针对着色性干皮病基因组F (Xeroderma Pigmentosum group F, XPF)基因设计合成小干扰RNA(small interference RNA, siRNA),在脂质体介导下转染人子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞,以降低子宫内膜癌细胞XPF的基因表达水平,减少ERCC1-XPF复合体的形成,从而减弱子宫内膜癌细胞DNA的修复功能,抑制子宫内膜癌细胞的增殖,提高子宫内膜癌细胞对铂类化疗药物的敏感性,降低其对铂类药物的耐药性。目的:本研究旨在探讨利用小干扰RNA沉默XPF基因后,对子宫内膜癌Ishikawa细胞卡铂敏感性的影响,为逆转子宫内膜癌铂类耐药寻找新的靶点和方法提供实验依据。方法:利用化学方法合成2条针对XPF的小分子RNA (XPF-siRNA1和XPF-siRNA2),利用脂质体将XPF-siRNA转染Ishikawa细胞后,运用RT-PCR法检测Ishikawa细胞XPF mRNA水平变化;Western Blot法检测XPF蛋白表达水平的变化;MTT实验检测RNA干扰后Ishikawa细胞对卡铂敏感性的变化,计算XPF-siRNA转染Ishikawa细胞后在卡铂刺激下半数抑制浓度(Inhibitant concentration50,IC50)的变化。结果: XPF-siRNA1及XPF-siRNA2转染Ishikawa细胞后,在倒置荧光显微镜下可见明亮的绿色荧光。XPF-siRNA1及XPF-siRNA2转染组XPF mRNA相对水平明显低于Neg-siRNA对照组;XPF蛋白相对表达水平明显低于Neg-siRNA对照组(p<0.05)。MTT实验结果表明,转染XPF-siRNA后,各组子宫内膜癌Ishikawa细胞在卡铂刺激下,细胞增殖抑制率有明显变化,XPF-siRNA1转染组为88.1%,XPF-siRNA2转染组为81.5%,而Neg-siRNA转染组为49.7%。IC50值在Neg-siRNA转染组为180.0±7.2μmol/L,XPF-siRNA1转染组为92.8±6.4μmol/L,XPF-siRNA2转染组为101.5±4.9μmol/L。XPF-siRNA1和XPF-siRNA2转染组IC50与Neg-siRNA转染组相比明显下降(p<0.05)。结论:本实验合成的XPF-siRNA1和XPF-siRNA2能有效降低子宫内膜癌Ishikawa细胞XPF mRNA水平及XPF蛋白的表达;转染XPF-siRNA1和XPF-siRNA2后,在等量的卡铂药物作用下,子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖抑制率明显增高,且卡铂对Ishikawa细胞的IC50降低,说明Ishikawa细胞对卡铂的敏感性增强;XPF表达水平的降低,减少了ERCC1-XPF复合体的形成,减弱了子宫内膜癌细胞DNA的修复功能,从而提高了子宫内膜癌细胞对铂类化疗药物的敏感性,降低其对铂类药物的耐药性。