子宫颈癌是可预防的,但是在一些经济不发达的所谓“第三世界”国家,子宫颈癌的发病率和死亡率一直居高不下。目前针对子宫颈癌的治疗已初具规模,手术和放化疗手段会根据病人的情况予以实施,适当的辅助治疗有助于提升抗肿瘤能力。对于晚期和复发性子宫颈癌患者,主要的治疗手段仍是化疗。在子宫颈癌的治疗中,Paclitaxel是最有效的化疗药物之一。Paclitaxel被广泛认为是一种微管稳定剂,也有研究报道Paclitaxel可以诱导DNA损伤,只是机制尚不清楚。在长期的化疗过程中,可能会出现肿瘤细胞的耐药性,从而减弱治疗效果。关于Paclitaxel的耐药性,有的研究者认为,肿瘤细胞中DNA损伤修复系统的高效性,使得DNA-损伤的化疗药物疗效变差。那么如果将化疗药物Paclitaxel和靶向于DNA修复途径中的抑制剂联合使用,可能会大大增强杀伤肿瘤的能力。而FEN1是DNA修复系统中的重要蛋白,参与长片段碱基切除修复(LP-BER)、双链断裂修复途径,并且在DNA复制过程中还发挥着关键作用。鉴于FEN1在DNA修复系统和DNA复制过程中的双重作用,在本实验中,我们使用已报道的靶向于FEN1蛋白的新型抑制剂SC13,并与化疗药物Paclitaxel联合使用。我们的研究结果表明,Paclitaxel和SC13的联合使用在子宫颈癌中具有协同效应。首先检测了 FEN1在子宫颈癌中mRNA及蛋白的表达水平,结果发现子宫颈癌中FEN1的表达上调。接下来,将SC13单独作用于两种子宫颈癌细胞系Hela和Siha中,筛选出对SC13最为敏感的Hela细胞系。SC13与Paclitaxel联合作用于Hela细胞系,通过细胞生长抑制实验和细胞克隆形成实验,发现两种化合物的联合使用能显著抑制细胞的生长,并且通过等效线图解法分析,两种化合物的联合使用能产生协同效应。我们先后检测了化合物处理之后,细胞的周期分布及细胞凋亡的情况,以此研究这两种化合物协同抑制细胞生长的原因。结果发现联合处理组的细胞在S期及G1期发生了阻滞,并且联合处理组中细胞凋亡的比例显著上升。为了进一步探究分子水平的机制,我们检测了试剂处理后细胞中的DNA损伤情况。通过γH2AX、53BP1 DNA损伤标记的检测,我们判断药物的联合使用使DNA发生了严重的损伤。DNA双链断裂的积累或许会导致染色体的断裂,所以我们同样检测了异常染色体的数量,结果联合处理组中的异常染色体数目更多。最后通过体内裸鼠成瘤实验发现SC13和Paclitaxel联合处理组中,小鼠肿瘤的生长抑制效果显著。此外免疫组化实验也与体外的细胞实验结果一致,即联合处理组的细胞DNA损伤积累的更多,并且细胞凋亡情况较单个处理组及未处理组都更加严重。综上所述,无论是子宫颈癌体内或体外实验,DNA损伤修复系统中的关键蛋白FEN1的抑制剂SC13可以作为化疗药物Paclitaxel强有效的增敏剂,这为生物靶向治疗和化学疗法的联合使用提供了新的依据,并且为子宫颈癌的治疗提供新的思路和策略。