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胃癌是全球范围内最常见的消化道恶性肿瘤之一,其发生发展是一个多因素和多方面互相作用的长期过程,涉及了癌基因的激活、抑癌基因的失活、细胞内信号传导通路异常以及多种生物因子共同作用等多个方面。有研究提示,磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinpsitol-3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(Protein kinase B,PKB/Akt)/雷帕霉素靶蛋白(Mechanistic target of rapamycin kinase,mTOR)信号传导通路在肿瘤的发生发展调控过程中起着重要作用,介导着下游信号分子的活化,调控肿瘤的增殖、侵袭、迁移、分化、凋亡、血管生成等重要过程。目前对PI3K/Akt/mTOR信号传导通路的研究颇多,但具体的作用途径及机制尚未完全清楚。已有研究表明在多种恶性肿瘤中,PTEN作为一种抑癌基因通过抑制Akt的磷酸化从而阻断了PI3K/Akt/mTOR信号传导通路起到抑癌作用。NPP4B基因(inositol polyphosphate 4-phosphatase type II,INPP4B)在PI3K/Akt/mTOR信号传导通路中发挥类似于PTEN基因的抑癌作用,但具体作用机制尚未有明确研究。EB病毒(epstein-barr virus,EBV)是胃癌发生发展中常见生物致病因子,有研究提示在EBV相关胃癌(Epstein-Barr virus associated gastric carcinoma,EBVaGC)发生发展过程中表观遗传异常发挥着关键的作用,EB病毒基因组的DNA甲基化决定着潜伏期的类型,抑癌基因的启动子区域CpG岛甲基化可导致细胞生长状态异常。目前研究表明EB病毒是首个被发现的可以编码微小RNA的病毒因素,其编码的微小RNA在细胞的各个生长过程中的免疫逃避发挥关键作用。本研究采用荧光实时定量PCR和蛋白质印迹法技术对人胃癌细胞系中INPP4B基因转录及表达水平进行研究,探究EBV阳性和阴性细胞系中INPP4B基因转录及表达水平的差异。采用甲基化特异性PCR技术检测EBV阳性和阴性细胞系中INPP4B基因启动子区域CpG岛甲基化状态,分析EBV感染对甲基化状态的影响,并且应用甲基化抑制剂对人胃癌细胞系进行处理,探讨在EBV相关胃癌细胞系中INPP4B基因启动子区域CpG岛甲基化状态对基因表达水平的影响。目的:检测EBV阳性及阴性胃癌细胞系中INPP4B基因的表达水平与启动子区域CpG岛甲基化状态,并探讨INPP4B基因启动子区域CpG岛甲基化状态对基因表达水平的影响。研究方法:选取EBV阳性和阴性胃癌细胞系作为研究对象,采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,real-time qPCR)和蛋白质印迹法(Western Blot,WB)技术检测细胞中INPP4B基因的转录及表达水平,同时采用甲基化特异性PCR(Methylation-Specific PCR,MSP)检测EBV阳性和阴性细胞系中INPP4B基因启动子区域CpG岛甲基化状态。结果:以甲基化抑制剂处理EBV阳性和阴性胃癌细胞系前为对照,甲基化抑制剂处理后INPP4B基因启动子区域CpG岛甲基化水平下降,同时INPP4B基因转录及表达水平升高。结论:启动子区域CpG岛甲基化是INPP4B基因失活的重要机制之一,并且甲基化抑制剂处理后可以上调胃癌细胞系中INPP4B基因转录及表达水平。