研究背景:近年来,胃肠胰神经内分泌肿瘤发病率明显上升,其中增加最显著的是胃和直肠。由于多数病人确诊时已经发生转移,失去最佳手术时机;且低分化的神经内分泌癌预后差。因此,研究胃肠胰神经内分泌肿瘤发生发展的分子机制,寻找有效的疗效预测因子及预后因子,是临床亟待解决的问题。人白血病相关蛋白16（leukem related protein16,LRP16）在乳腺癌、肺癌、胃癌等多种肿瘤的发生发展中起着重要作用。它是多个核受体的辅因子,同时也是核因子κB（Nuclear factor kappa-B,NF-κB）的共激活因子,可通过调控NF-κB,在肿瘤放、化疗抵抗中起着重要作用。程序性细胞死亡配体1（Programmed death-ligand l,PD-L1）是免疫检查点分子之一,可在多种肿瘤细胞表达。目前抗PD-1/PD-L1治疗在多种肿瘤中取得了良好效果,但治疗响应率并不高,调控肿瘤PD-L1表达的机制也不完全清楚。有文献报道NF-κB参与了肿瘤细胞PD-L1的上调。LRP16是否参与了PD-L1的调控,目前尚未见报道。目的:探讨LRP16、PD-L1在消化道NENs中表达情况及意义,分析其在肿瘤发生发展中的作用,对预后的影响;探讨LRP16对神经内分泌癌细胞增殖和侵袭能力的影响;LRP16对PD-L1表达的影响。方法:1.选取解放军总医院第五医学中心病理科2004-2016年114例消化道NENs病例及32例瘤旁正常组织。（1）免疫组织化学染色方法检测LRP16、XIAP、survivin、bcl-2、α-catenin在消化道NENs中的表达水平,（2）PD-L1在肿瘤细胞及免疫细胞中的表达水平及分布特征,（3）分析LRP16、PD-L1与NENs临床病理特征间的关系;（4）统计学方法分析 LRP16 与 PD-L1、XIAP、survivin、bcl-2、β-catenin 之间的相关性。（5）利用RNAscope方法检测NETs、NECs和正常组织LRP16mRNA的表达水平。2.在人小细胞肺癌细胞系（高级别神经内分泌癌）H446采用瞬时转染方法抑制LRP16基因表达,并行CCK8、Transwell小室实验检测LRP16沉默组与对照组的细胞增殖、侵袭能力的变化;3.利用qRT-PCR、Western blot实验检测LRP16沉默组与对照组PD-L1、XIAP、cIAP2、p65在mRNA和蛋白水平的差异性,初步分析LRP16对PD-L1的调控机制。结果:1.（1）LRP16在消化道NENs肿瘤细胞的表达水平显著高于瘤旁正常组织,且与淋巴结转移、远处转移和较高的临床分期有关。单因素及多因素生存分析显示其高表达提示更短的总生存时间（P<0.05）。RNAscope检测结果提示:在NENs中LRP16mRNA也高于瘤旁组织。（2）PD-L1在NECs肿瘤细胞的表达显著高于NETs（P<0.05）,且与肿瘤大小、临床分期、远处转移呈正相关（P<0.05）;而肿瘤相关免疫细胞表达PD-L1,NECs也显著高于NETs（P<0.05）。单因素生存分析和COX回归模型进行多因素生存分析均显示肿瘤细胞表达PD-L1是独立的预后因子,高表达提示更短的总生存时间。（3）LRP16阳性表达与PD-L1、XIAP、survivin均呈正相关。2.敲低LRP16可降低H446细胞系的增殖及侵袭能力。3.敲低LRP16后,实验组H446细胞PD-L1、XIAP的mRNA水平与阴性对照组相比也明显下调,差异具有统计学意义（P<0.05）。Western blot检测显示在蛋白质表达水平也有同样变化（P<0.05）。结论:1.LRP16,PD-L1均为消化道NENs独立的预后因子,且二者呈正相关。2.LRP16与SCNEC增殖、侵袭密切相关。3.敲低LRP16基因可导致PD-L1、XIAP在mRNA水平和蛋白质水平的下调。4.LRP16不但参与了肿瘤的发生发展,还通过调控PD-L1表达参与了免疫逃逸。意味着LRP16可能成为一个理想的治疗靶点。阻断LRP16,不但可以降低肿瘤的增殖、迁移能力,也可能提高对治疗的敏感性,恢复免疫系统的抗肿瘤能力,达到抑制肿瘤的目的。