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目的:本项实验以自然衰老的C57/6小鼠作为老年性耳聋的模型,观察穴位埋线肾俞穴和足三里对老年性耳聋小鼠耳蜗螺旋神经元GABAA受体与NMDA受体的时序性表达的干预,以及应用ABR仪器来测定小鼠在听力高低频区的阈值,探究埋线改善耳蜗老化的机制,验证中医肾主耳理论的机制。材料与方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠110只,先随机抽取10只作为青年组来测量ABR的阈值,自然衰老组与埋线组各随机抽取10只,处死小鼠应用RT-PCR法测量NMDA受体与GABAA受体的表达情况,剩下80只鼠分为两组,自然衰老组正常饲养,不做任何处理,埋线组小鼠肾俞与足三里埋线,埋线方法:将羊肠线裁剪3mm,放入5号注射器针头中,刺入小鼠穴位下,深度为3mm,用0.25×0.40mm华佗牌针灸针将羊肠线推入穴位中,埋线两周一次,共8次,在小鼠16周,20周,24周,28周时候分别抽取10只,测定ABR阈值后处死小鼠,观察指标的表达的情况。结果:1.在同一频率刺激下的自然衰老组小鼠,与第12周比较,16周ABR值变化无统计学意义(P>0.05);与第16周比较,小鼠第20周、24周、28周ABR值明显升高,听力损失明显,差异具有统计学意义(P<0.05),且随周数增加,ABR值均逐渐升高(P<0.05)。同一频率刺激下,与青年组比较,在第12周及16周时,自然衰老组、埋线组小鼠ABR值变化均无明显差异(P>0.05);第20周、24周及28周时,自然衰老组、埋线组小鼠ABR值显著升高且差异有统计学意义(P<0.05)。与自然衰老组比较,在第12周、16周及20周时,埋线组小鼠ABR值变化均无统计学意义(P>0.05);在第24周、28周时ABR值明显降低(P<0.05),且埋线组在20周之后ABR阈值趋于稳定,听力损伤程度较小,差异无统计学意义(P>0.05)。2.结果显示自然衰老组小鼠在16周时GABAA受体表达量与12周对比,差异无统计学意义(P>0.05),与第16周比较时,第20,24,28周GABAA受体表达量明显降低,证明听力损失明显,差异符合统计学意义(P<0.05),且随着周数增加,GABAA受体表达量明显下降(P<0.05)。同青年组小鼠对比,在第12周及16周时,自然衰老组、埋线组小鼠GABAA受体表达量均无明显差异(P>0.05);第20周,24周,28周时,两组小鼠GABAA受体表达量显著降低(P<0.05),与自然衰老组比较,埋线组12周,16周,20周GABAA受体表达量的变化无统计学意义(P>0.05),在第24周,28周时GABAA受体表达量明显高于自然衰老组,差异有统计学意义(P<0.05),且埋线组在20周之后GABAA表达量趋于稳定,听力损伤程度较小,差异无统计学意义(P>0.05)。3.结果显示自然衰老组小鼠在16周时NMDA受体表达量与12周对比,差异无统计学意义(P>0.05),与第16周比较时,第20,24,28周GABAA受体表达量明显升高,证明听力损失明显,差异符合统计学意义(P<0.05),且随着周数增加,GABAA受体表达量明显增加(P<0.05)。同青年组小鼠对比,在第12周及16周时,自然衰老组、埋线组小鼠GABAA受体表达量均无明显差异(P>0.05);第20周,24周,28周时,两组小鼠GABAA受体表达量显著升高(P<0.05),与自然衰老组比较,埋线组12周,16周,20周GABAA受体表达量的变化无统计学意义(P>0.05),在第24周,28周时GABAA受体表达量明显低于自然衰老组,差异有统计学意义(P<0.05),且埋线组在20周之后NMDA表达量趋于稳定,听力损伤程度较小,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1当听力下降时,小鼠ABR阈值明显增加,肾俞与足三里埋线可以降低ABR阈值。2正常SGN中GABAA数量较高,NMDA受体含量低,当听力下降时GABAA受体数量降低,NMDA受体含量增加,肾俞与足三里埋线可调节这两个受体的表达。3自然衰老组小鼠ABR阈值与受体表达量在第20周,24周,28周呈时序性表达,而通过肾俞与足三里埋线的干预改变了实验结果,且最佳干预点为第16周。4肾俞穴与足三里穴可以作为人体的保健穴对老年性耳聋具有预防与治疗的作用,其作用机制可能是通过延缓耳蜗中毛细胞的凋亡而实现的。