粮食加工污染物调查及降解黄曲霉毒素B1菌株的初步研究

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黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)是真菌毒素中的一种,多存在于谷物中,被世界卫生组织认定为Ⅰ级致癌物,对人类健康和经济发展存在巨大威胁。AFB1高效经济的脱去已成为研究人员广泛关注的问题,生物降解AFB1因其具有低成本、高效率和良好的安全性而被重点关注。本研究调查分析了我国部分地区稻谷、小麦、玉米及其制品中真菌毒素和重金属的污染现状,筛选出了可高效降解AFB1的菌株并进行鉴定,优化其生长条件,初步探究其降解机理及特性。具体研究结果如下:通过检测我国部分地区稻谷、小麦、玉米及其制品中真菌毒素和重金属的含量,统计分析真菌毒素污染现状。结果表明,稻谷及其制品中真菌毒素检出率由高到低依次为ZEN>AFB1>AFB2>AFG1>DON>AFG2;小麦及其制品中AFB1和DON毒素都呈现高阳性率,但超标率维持在较低水平;玉米及其制品中ZEN检出率高达100.00%,超标率为4.44%。稻谷和米粉及其制品中重金属检出率由高到低依次为镉>铅>汞,超标率由高到低依次为铅>镉>汞。通过与AFB1共培养筛选可高效降解AFB1的菌株。结果表明,从62株菌株中筛选出11株可降解AFB1的菌株,其中MD1与AFB1共培养72 h后对AFB1的降解率高达99.2%,经形态学和ITS r DNA基因鉴定,确定菌株MD1为郝克氏青霉(Penicillium herquei)。通过对郝克氏青霉MD1降解AFB1的条件进行优化,提高郝克氏青霉MD1降解AFB1的降解率。结果表明,单因素实验显示接种量为2%,转速为160 r/min,培养基初始p H为7,培养时间为72 h,培养温度为28℃时,菌株MD1与AFB1共培养24 h后对AFB1的降解率最高。响应面优化实验显示以培养温度为28℃、培养基初始p H为8、接种量为1%时菌株MD1与AFB1共培养24 h后对AFB1的降解率可达到最大值,优化后测得的AFB1降解率较单因素优化(86.84%)提升了11.73%。通过分离郝克氏青霉MD1菌悬液中的菌体和发酵液,探究其菌悬液、菌体、孢子液、发酵液降解AFB1的有效部位,并将有效部位菌体破碎后作进一步探究。结果表明,培养72 h后的郝克氏青霉MD1菌悬液和未破碎菌体对AFB1降解率分别为98.15%和28.20%,菌体破碎后对AFB1的降解效果更好,培养24 h后对AFB1的降解率为55.40%。
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