益气养阴祛瘀煎剂对NOD小鼠颌下腺和血清IFN-γ、IL-10的影响

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1.研究目的在运用益气养阴祛瘀方药治疗SS临床有效的基础上,通过研究其对自发型SS小鼠模型饮水量、颌下腺、免疫器官指数、颌下腺和血清Th1/Th2样细胞因子(IFN-Y. IL-10)指标的影响,探讨中药益气养阴祛瘀方(由黄精、生晒参、女贞子、红景天、青蒿、肿节风、茜草、杭白芍、乌梅等中药组成)治疗SS的可能机制。2.对象与方法实验动物选择NOD小鼠60只及ICR正常小鼠10只,8周龄,雌性,均为SPF级,于无特殊病菌的恒温条件下喂养(上海斯莱克动物实验中心提供)。NOD小鼠随机分为6组。即模型组、中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、羟氯喹组、中西药组(中药中剂量+羟氯喹)。ICR正常小鼠10只,为正常对照组。实验过程中,每日测定各组小鼠的饮水量。每天给水前,称各组饮水瓶总重量,24小时后,称各组饮水瓶总重量,两者之差为各组小鼠每日饮水量。各组NOD小鼠分别于实验第八周末时股动脉取血,采用ELISA去检测血清IFN-γ、 IL-10的浓度。小鼠股动脉取血后处死,摘取小鼠脾脏及颌下腺,称重,计算脾脏、颌下腺指数。摘取到的颌下腺一部分用免疫组化法检测颌下腺IFN-γ、IL-10水平。另一部分在光镜下观察小鼠颌下腺病理改变。3.结果3.1血清IFN-γ、IL-10检测结果:模型组和正常对照组相比,IFN-γ、IL-10均明显升高,差异显著(p<0.01),小剂量组和模型组比较差异不明显(p>0.05),其余给药组和模型组比较明显下降,差异显著(p<0.01)。3.2颌下腺、脾脏指数检测结果:模型组和正常对照组相比,颌下腺、脾脏指数均明显增大。给药组中,小剂量组颌下腺指数和模型组比较有差异(p<0.05),其余给药组颌下腺、脾脏指数和模型组比较,差异显著(p<0.01)。3.3饮水量测量结果:模型组小鼠的饮水量明显高于正常组和给药组。其中模型组和正常组比较明显升高,差异显著(P<0.01),用药组和模型组比较,饮水量下降明显,差异显著(P<0.01)。3.4免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度:模型组与正常组比较,IL-10水平表达明显升高(P<0.05);‘给药组中除羟氯喹组和模型组比较下降不明显(p>0.05),其余各组和模型组比较下降明显(p<0.05),其中中西药结合组、大剂量组下降显著(p<0.01)。4.结论(1)模型组和正常组对照组比较,IFN-γ、IL-10细胞因子水平在领下腺及血清中表达明显升高,免疫系统异常激活。(2)益气养阴祛瘀煎能够明显减少SS饮水量,改善颌下腺的病理损害降低NOD小鼠血清及颌下腺中IFN-γ、IL-10水平。(3)益气养阴祛瘀煎可能通过降低IFN-γ、IL-10在血清及颌下腺中的表达,调节(Th1/Th2)细胞的免疫平衡,从而减轻领下腺分泌功能的损伤。
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