水体锌暴露对斜带石斑鱼胚胎糖代谢的影响

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斜带石斑鱼(Epinephelus coioides),俗称青斑,是石斑鱼属(Epinephelus)极具代表性的养殖品种,世界性名贵海产经济鱼类。近年来由于近海重金属污染加剧,我国斜带石斑鱼自然资源量日益衰竭,人工育苗成活率低下。目前为止,关于重金属对石斑鱼早期发育影响的研究极其缺乏。锌是我国近海常见的重金属污染物,可通过食物链传递导致石斑鱼重金属高累积,进而带来负面影响,产生毒性作用。但是锌也是动物必需痕量元素,具有类胰岛素的作用,通过激活胰岛素信号通路影响体内的糖代谢过程。糖酵解和糖异生是糖代谢的主要途径之一,而Akt信号通路是锌模拟胰岛素作用所激活的途径。近几年在哺乳动物中的研究发现锌可以影响上述三个通路相关基因的表达,然而在鱼类中还未有相关研究报道。本文主要研究水体锌暴露对斜带石斑鱼胚胎糖酵解、糖异生、Akt信号通路基因表达的影响以及重金属锌在鱼类胚胎中的生物累积规律,其主要研究结果如下:1斜带石斑鱼胚胎在不同水体锌(67Zn)浓度(对照,0.05、0.10、0.20、0.70、2.00、4.00和8.00 mg/L)经5、10、15、20、24、28小时暴露后,测定了鱼类胚胎体内锌生物累积量。结果显示,在每个时期,胚胎的67Zn生物累积量与水体67Zn浓度呈正相关,67Zn的吸收率随着胚胎发育而呈下降趋势。结果表明,重金属在胚胎中的累积与浓度、暴露时间有关。2斜带石斑鱼胚胎在不同水体锌浓度组(对照,0.05、0.10、0.20、0.70、2.00、4.00和8.00 mg/L)暴露后,测定了其糖酵解、糖异生和Akt信号通路相关基因m RNA表达水平的变化。经水体锌暴露后,桑椹胚期、囊胚期、原肠胚后期、神经胚期和心跳期,上调了PFK基因的m RNA表达水平,而在孵化期呈下调趋势。囊胚期和原肠胚后期,67Zn下调了胚胎PK基因的表达,而在神经胚期呈上调趋势。2.00、4.00和8.00mg/L水体67Zn浓度组显著调节PC基因的表达(P<0.05)。从桑椹胚期到囊胚期,高浓度组(4.00和8.00 mg/L)显著下调PCK基因表达,孵化期则表现为上调(P<0.05)。水体锌暴露对FBP表达有显著的调控作用(P<0.05)。从心跳期到孵化期,水体锌暴露显著下调的G6PC的表达(P<0.05)。水体67Zn浓度组显著上调IR基因表达(P<0.05)。在囊胚期和原肠胚后期,0.05 mg/L锌浓度组显著上调AKT2的表达(P<0.05)。在桑椹胚期,4.00 mg/L的67Zn浓度可显著上调AKT2基因的表达(P<0.05)。在桑椹胚期和囊胚,水体67Zn浓度组显著下调GSK-3beta的表达(P<0.05)。然而,低浓度组在胚胎发育后期也上调GSK-3beta的表达(P<0.05)。水体67Zn暴露显著下调桑椹胚期GLUT4基因的表达,原肠胚后期显著上调GLUT4的表达(P<0.05)。此研究结果首次证明了水体锌暴露能通过时间依赖和剂量效应影响鱼类胚胎糖代谢关键酶和相关基因的表达,为鱼类胚胎金属毒理学和糖代谢提供了新的研究依据。
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