TGF-β1诱导人子宫颈腺癌Hela细胞上皮间质转化的实验研究

被引量 : 0次 | 上传用户:nafei123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:宫颈癌是女性妇科三大恶性肿瘤之一,宫颈腺癌是宫颈癌第二多见的组织学类型,约占宫颈癌的10%,宫颈腺癌较宫颈鳞癌更易于发生转移,预后差。近年来研究发现上皮间质转化(Epithelial-MesenchymalTransitions,EMT)与肿瘤的发生发展有重要联系。转化生长因子β1(Transforming growth factor beta1,TGF-β1)已被证实是上皮间质转化的重要诱导剂,本实验拟通过体外培养人宫颈腺癌Hela细胞,在TGF-β1诱导下体外构建Hela细胞上皮间质转化模型,研究其对Hela细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法:体外培养人宫颈腺癌Hela细胞,分为实验组:用不同浓度TGF-β1(0.01、0.1、1、10ng/ml)刺激Hela细胞,对照组:用不含TGF-β1的无血清培养基培养Hela细胞。①用不同浓度TGF-β1(0.01、0.1、1、10ng/ml)刺激Hela细胞后于不同时间点观察其细胞形态变化;②不同浓度TGF-β1刺激Hela细胞72h后,用半定量RT-PCR法检测上皮间质转化相关标记物E-cadherin及Vimentin mRNA表达情况;③不同浓度TGF-β1刺激Hela细胞后,细胞免疫组织化学方法检测E-cadherin,Vimentin蛋白的表达变化;④用CCK8法检测不同浓度TGF-β1刺激Hela细胞后对其增殖影响;⑤用流式细胞仪检测不同浓度TGF-β1刺激Hela细胞72h时对其凋亡的影响;⑥用10ng/ml TGF-β1刺激Hela细胞后用划痕实验检测其细胞迁移能力的变化。结果:①倒置显微镜下观察到不同浓度TGF-β1刺激Hela细胞24h时与对照组相比形态未发生明显变化;刺激48h时就开始出现变化,细胞伸出许多小突出,部分失去多边形或立方形形态变为梭形;刺激72h后变化更明显,与对照组比较,实验组大部分细胞呈现明显的间质细胞形态,表现为细胞拉长呈梭形或纺锤形,细胞的间隙变宽,细胞与细胞之间的连接变得松散,细胞由铺路石样分布变为不规则的分布;②RT-PCR检测结果显示:TGF-β1刺激后,Hela细胞的上皮标记物E-cadherin mRNA表达下调,间质标记物Vimentin mRNA表达上调且均呈浓度依赖性,与对照组相比差异有统计学差异(P<0.05);③细胞免疫组织化学结果显示:TGF-β1刺激后,随着TGF-β1浓度的增加E-cadherin蛋白的表达逐渐降低,Vimentin蛋白的表达则逐渐升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);④CCK-8检测结果显示:TGF-β1刺激后,24h时不同浓度TGF-β1对Hela细胞增殖无明显作用,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),48h和72h后对Hela细胞生长增殖起抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),且呈时间和浓度依赖性;⑤流式细胞仪检测结果显示:TGF-β1刺激人宫颈腺癌Hela细胞72h时,随着TGF-β1浓度的增加Hela细胞的凋亡率也逐渐增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);⑥10ng/ml TGF-β1刺激Hela细胞后其迁移能力增强。结论:①TGF-β1可以诱导人宫颈腺癌Hela细胞发生上皮间质转化;②TGF-β1对人宫颈腺癌Hela细胞的生长增殖起抑制作用并能诱导其发生凋亡;③TGF-β1可增强子宫颈腺癌Hela细胞的迁移能力。
其他文献
火灾是高层建筑安全的主要威胁之一。建筑物在火灾作用下的力学响应是整体结构的行为,其主要特点是结构系统内受火区域子结构的刚度和承载力随火灾的发展而变化,进而引起结构
目的系统评价艾拉莫德治疗类风湿性关节炎(RA)的疗效与安全性。方法按循证医学的要求,制定相应的纳入标准、排除标准及检索策略,检索PubMed、Cochrane Library、Wiley Online
本文选择17种北京画报和6种上海画报,同时补充以档案、野史、笔记、小说、竹枝词等多种材料,揭示图像资料关于帝都北京的记忆、想像、窥视与重现,解读清末的文化变革,集中地
对压缩单裂纹圆孔板(single cleavage drilled compression——SCDC)砂岩试样,利用分离式霍普金森压杆(SHPB)冲击加载,进行了岩石张开型(I型)动态断裂实验。分别采用2种方法
目的:绝经后妇女骨质疏松症(PMOP)主要是女性生理性绝经后,由于雌激素缺乏导致骨量减少及骨组织结构变化,骨吸收与骨形成过程失衡引起的。传统上多采用雌激素替代疗法,但是毒
<正> 一、引 言 湖南省是国内重要林区之一。关于林区中所产鸟类,已往资料是很贫乏的。1900年,Ogilvie-Grant记述自湖南洞庭湖至云南西部所采到的鸟类,其中采自湖南境内的仅3
以苏州拙政园的园林景观水为研究对象,根据其景观水体的污染现状及其景观的特点,基于地下渗滤系统工作原理,设计了处理园林景观水的地下渗滤系统,着重对地下渗滤系统处理园林
莫言和马尔克斯是同属"魔幻现实主义"这面旗帜下的优秀作家。莫言和马尔克斯"魔幻现实主义"创作特征的"同源异质"可以从环境资源、人生经历资源、民间资源三个层面来考察,同
<正>人才培养模式是教育质量的首要问题[1],深化人才培养模式改革是提高教育质量的关键[2]。为了提高医学人才培养质量,加快医学人才培养模式改革,教育部、卫生部等部门达成
通过问卷调查,对投资者参与股票论坛现状进行统计分析,并从信息内容和行为因素两个方面对投资者参与股票论坛的影响因素进行讨论。研究表明,股票论坛在中国投资者群体中已较