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神经介素U(NeuromedinU,NMU)在调节摄食行为和能量平衡方面发挥着重要的作用,因此对NMU通路的研究非常必要,然而目前关于NMU通路与其他摄食相关通路的相互关系研究较少。
本文采用脑室注射的给药方式,对大鼠NMU通路以及中枢黑皮质素(MC)受体途径(MC3/4R)的相互关系进行了初步的研究,同时通过对介导NMU活性的Neuromedin U 2 R(NMU2R)的小分子激动剂研究,进一步探讨两种相关通路的关系。
1.中枢NMU对大鼠摄食量、摄水量和体重的影响为了观察NMU在中枢神经系统中调节动物摄食行为的作用,向大鼠脑室内注射NMU,通过测定大鼠摄食量、摄水量以及体重的变化,探讨中枢系统中的NMU对动物摄食行为的调节作用。结果表明,脑室注射NMU对大鼠食欲有显著抑制作用,并能够有效的降低大鼠的摄水量,抑制大鼠体重的增加。中枢神经系统中的NMU能够有效的调节动物的摄食行为。
2.中枢NMU抑制食欲作用受黑皮质激素受体途径部分介导为了研究中枢NMU与中枢黑皮质激素受体途径在调节摄食行为方面的相互作用关系。对禁食或不禁食大鼠脑室注射NMU2R内源性配体NMU和MC3/4R信号途径高亲和力的拮抗剂SHU9119,通过测定不同时间点大鼠摄食量和体重的变化,探讨中枢NMU2R和黑皮质素受体途径在调节动物摄食行为上的作用及其相互关系。在向脑室内同时注射NMU和SHU9119的情况下,NMU对大鼠的食欲抑制作用会部分受到MC3/4R信号途径变化的影响；同样,对SHU9119前处理大鼠脑室内注射NMU,NMU抑制食欲的作用也会明显降低,其在摄食方面的作用被部分抑制。结果提示,NMU调节摄食行为的作用可能部分受MC受体途径介导。
3.NMU2R小分子激动剂的活性分析为了检测已筛选出来的NMU2R小分子激动剂的活性大小,利用NMU2R细胞株,采用报告基因的方法检测各种化合物的浓度-响应值关系,并比较各种化合物EC50的大小,从而选择响应值较好的化合物。
结果显示,多种化合物对NMU2R的激活作用有剂量-依赖关系,EUK2040、EUK2047及EUK2085均具有良好的活性,EC50分别为16.666μM,33.723μM和47.044 μM。 4.脑室注射EUK2085对大鼠摄食量、摄水量以及体重的影响EUK2085是体外筛选出的NMU2R小分子激动剂,在细胞水平上具有一定的活性。通过脑室注射的方式将NMU2R的小分子激动剂EUK2085注射给大鼠,进行摄食行为以及部分相关基因(NMU、POMC和MC4R)表达情况的研究,结果显示,与对照组相比,EUK2085可显著增加大鼠禁食后各时间点的累积摄食量,对大鼠在12 h内的体重增量也有明显的增加作用(虽未达统计学意义)。同时,RT-PCR结果显示,脑内注射EUK2085对大鼠下丘脑NMU、POMC和MC4R基因的表达无影响,提示EUK2085在大鼠中枢的作用与可能与NMU2R或MC信号通路无关。