猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种烈性传染病,主要以妊娠母猪发生早产、流产、死胎、大型木乃伊胎、产弱仔及仔猪的呼吸道疾病为特征。本试验进行了白城地区高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定,从疑似患猪繁殖与呼吸综合征病猪的肺组织中分离出一株能引起MARC-145细胞典型病变的病毒,经RT-PCR、理化特性鉴定、血清学试验、电镜观察等方法鉴定,该分离毒株为猪繁殖与呼吸综合征病毒,命名为BC株。参考GeneBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒基因序列,设计2对特异性引物,对BC株GP4、GP5二种主要结构蛋白基因进行了RT-PCR扩增。测序结果表明,BC株GP4蛋白基因全长537bp、编码179个氨基酸；GP5蛋白基因全长603bp、编码200个氨基酸。分别将BC株GP4、GP5基因克隆至原核表达载体,并获得成功表达。经Western blot免疫印迹检测,表达蛋白的分子量约为35kDa和25kDa,该产物可与PRRSV阳性血清发生特异性反应,具有免疫源性；并对表达条件进行了优化,将纯化后的GP4、GP5蛋白作为包被抗原,经间接ELISA检测,均与猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清发生特异反应。这为建立针对该病毒抗体的间接ELISA检测方法和一种适合临床实践快速、敏感、特异的猪繁殖与呼吸综合征抗体检测诊断试剂的研发奠定基础。