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燃油中含硫化合物的燃烧产生的硫氧化物是造成环境污染的重要原因之一。各国政府都颁布了条例限制燃油中的硫含量。常规的加氢脱硫技术不能有效地脱去燃油中的有机硫。DBT是燃油有机硫脱硫技术研究中的模式化合物。生物脱硫技术具有温和,特异性,低能耗的特点,可以低成本地脱去DBTs中的硫。微生物降解DBTs的途径多种多样,其中“4S”脱硫途径最引人关注。
二苯并噻吩单加氧酶DszC和二苯并噻吩砜单加氧酶DszA在红球菌的DBTs降解途径“4S”途径的前三步反应中起着催化作用。我们分别对DszC和DszA蛋白进行了大肠杆菌外源过量表达,纯化与结晶。我们解析了DBT单加氧酶DszC蛋白分辨率为2.4 A的晶体结构,并优化DszA蛋白的晶体到了较高的分辨率。
DszC蛋白晶体结构数据和分析性超速离心结果都表明DszC蛋白的溶液聚合形式为四聚体。DszC蛋白的单体结构包含两个结构域,结构域Ⅰ和结构域Ⅱ,分别由α螺旋束和β折叠桶组成。我们通过同源结构比对和实验验证,发现DszC蛋白具有一个特殊的C端无规则卷曲,它在维持蛋白结构的聚合形式和蛋白活性中都起着重要的作用。