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伪狂犬病（Pseudorabies）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的各种家畜及野生动物以发热、奇痒及脑脊髓炎为特征的急性传染病。该病自1947年传入我国,通过疫苗免疫疫情基本呈稳定状态。2011年以后,以HeN1株为代表的变异株在全国多个地区爆发流行,原有疫苗不能对猪群提供完全保护,这对伪狂犬病的监控及病原结构的研究提出了新的要求。猪伪狂犬病毒gB糖蛋白具有很好得保守性,通过检测gB蛋白可以反映猪群的抗体水平。本实验目的是制备抗PRV gB蛋白的单克隆抗体并鉴定其抗原表位。以超离纯化的PRV HeN1株全病毒为抗原免疫6周龄BALB/c小鼠,取免疫后血清抗体呈阳性的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,用免疫荧光的方法（IFA）筛选阳性杂交瘤细胞,经过4次亚克隆获得一株稳定分泌抗PRV gB蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E7。Western blot结果表明,1E7细胞分泌的单克隆抗体与PRV全病毒和真核表达的gB蛋白均能反应。抗体亚类鉴定1E7细胞分泌的单抗重链属于IgG2b亚类,轻链为kappa链。ELISA试验显示1E7细胞分泌的单抗与PRV的结合可以被猪阳性血清阻断。杂交瘤细胞培养上清和制备的腹水中抗体的IFA效价分别为1:160和1:12800。利用大肠杆菌原核表达系统,表达一系列gB截短蛋白,最终确定1E7细胞分泌的单抗识别的抗原表位是S81AEESLE87,且此表位在各PRV毒株间相对保守。本单克隆抗体的成功制备为PRV抗体检测方法的建立及gB蛋白的结构和功能研究提供了实验材料。