基于寡聚核苷酸和二维纳米材料构建高灵敏电化学生物传感平台

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电化学生物传感器是将生物物质的浓度及其敏感程度转化为电信号的一种装置,近年来在临床、医药、环境等领域深受研究者的广泛关注。MicroRNA是一种非编码RNA分子,在生物生长发育、增殖分化、器官发育等过程中发挥着重要的作用。蛋白质是生物体中的必要组成成分,参与体内多种生理反应,调节机体活动并促进体内新陈代谢。因此,使用电化学生物传感平台对这些生物分子进行快速、灵敏检测有极大的研究价值。本文将寡聚核苷酸和二维纳米材料相结合构建了电化学生物传感器,用于蛋白质和microRNA的灵敏、特异性检测。主要研究内容如下:(1)制备了硫掺杂还原氧化石墨烯,将其作为传感器电极基底材料。设计了两个发卡RNA链(HP1和HP2),首先将HP1固定在电极表面,通过碱基互补配对与将HP2引入电极表面,再将链霉亲和素标记的碱性磷酸酶(SA-ALP)引入电极表面,当有目标蛋白质存在时,复合结构被破坏电化学信号减弱,据此建立凝血酶检测新方法。新方法线性范围为1×10-11-2×10-10 mol/L,检出限为2.76×10-12 mol/L(S/N=3)。(2)合成了氮磷共掺杂的还原氧化石墨烯,将其作为传感器电极基底材料,通过四面体DNA探针与滚环扩增技术(RCA)构建凝血酶电化学传感器。该传感器具有稳定性好和选择性高等特点,线性范围为1×10-13-1×10-7 mol/L,检出限为3.53×10-14 mol/L(S/N=3),可用于实际样品分析。(3)以SiO2纳米球为模板合成由MoSe2纳米片组成的纳米球复合材料,并将其作为电极基底材料,固定上金纳米粒子,并与杂交链式反应相结合,构建了新型电化学传感器,用于microRNA的灵敏检测。线性范围为1×10-16-1×10-10mol/L,检出限为0.016 fmol/L。新方法具有灵敏度高、选择性好、重现性好等优点,可用于实际样品分析。
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