不同氧浓度培养条件下MEF、hiPSc线粒体的形态、分布和功能的研究

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目的:  研究不同氧浓度中 hiPSc细胞中线粒体的形态、分布和功能的变化情况,为hiPSc细胞培养体系的优化提供实验依据。  方法:  将细胞分别在20%氧浓度(常氧组)和5%氧浓度(低氧组)中培养,在细胞对数生长期时用台盼蓝染色法进行活细胞计数;Mito-Tracker Green对细胞线粒体染色并在激光共聚焦显微镜下观察,鉴定线粒体在细胞内分布情况并统计所占比例;ATP试剂盒检测细胞内ATP合成量。  结果:  1.低氧组中MEF及hiPSc细胞增殖较快,当细胞生长至细胞对数生长期时,活细胞数量高于常氧组培养的MEF及hiPSc细胞,活细胞量差异显著(P<0.05)。  2.当细胞生长至细胞对数生长期时,不同氧浓度培养条件下的MEF及hiPSc细胞内线粒体分布类型有明显差异,低氧组细胞内的线粒体核周分布类型比例要高于常氧组的细胞。相反,低氧组细胞内的线粒体均匀分布类型比例则要低于于常氧组的细胞,且差异有统计学意义(P<0.05)。  3.当细胞生长至细胞对数生长期时,低氧组细胞内的ATP含量高于常氧组的细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。  结论:  不同氧浓度中hiPSc细胞中的线粒体的形态、分布和功能有明显的变化,低氧对hiPSc的生长与干细胞全能性的维持相比于常氧更有利。
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