锦灯笼果实多糖在核酸疫苗中免疫增强作用研究

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锦灯笼为一种多年生茄科草本植物,其全草、根及果实均可入药,全株具有药用价值。果实具有清热解毒、镇咳利尿的功效;果实水提物有抗癌作用,对小鼠艾氏(Ehrlich)腹水癌细胞的生长有抑制作用;果实鲜汁可抑制金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌,乙型肝炎病毒表面抗原的活性。近几年,随着对植物多糖研究的逐步深入,人们发现很多植物多糖都具有良好的免疫调节功能。本实验室对锦灯笼果实水溶性多糖进行研究,研究结果表明,锦灯笼果实多糖具有显著的免疫增强作用。本论文以锦灯笼果实水溶性多糖(PPSB)作为疫苗佐剂与核酸疫苗共同免疫ICR小鼠,免疫方式为肌肉注射后进行电转导,共免疫两次,免疫间隔时间为两周,第二次免疫两周后对免疫小鼠进行眼球取血,收集抗血清后,通过以下实验来研究PPSB的免疫增强作用:Western Blot实验检测免疫小鼠抗血清中抗体的特异性;ELISA实验检测抗血清中特异性抗体滴度;ELISA试剂盒检测抗血清中IL-2、4的含量。此外,免疫保护实验研究PPSB对pD-HSP90C免疫小鼠抗系统性白色念珠菌的影响:以尾静脉注射的方式使免疫后小鼠感染白色念珠菌,15天后,统计免疫后小鼠肾脏的真菌负荷量、制作肾脏组织切片,观察、分析白色念珠菌感染免疫后小鼠肾脏组织的结构变化。实验结果表明,PPSB与核酸疫苗共同免疫小鼠后,其血清中特异性抗体IgG、IgG1及IgG2b滴度及IL-2、IL-4含量明显高于核酸疫苗单独注射组;免疫保护实验结果显示,PPSB与核酸疫苗共同免疫组小鼠肾组织匀浆培养得到的白色念珠菌菌落数显著少于核酸疫苗单独处理组;肾脏组织切片的分析结果表明,PPSB与核酸疫苗共同免疫组小鼠肾小球、肾小管受损程度明显弱于核酸疫苗单独处理组。本实验结果有利的证明PPSB作为核酸疫苗佐剂显著增强了Th1和Th2免疫应答,显著提高核酸疫苗免疫小鼠抵抗系统性白色念珠菌的感染能力,为PPSB在的疫苗佐剂领域中的应用奠定了坚实基础。
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