【摘 要】
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目的明确肥大细胞糜蛋白酶是否存在于人增生性瘢痕组织中以及其是否是通过TGF-β1/Smads信号转导通路起到促纤维化作用。方法免疫组化检测增生性瘢痕组织和正常皮肤中肥大细
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目的明确肥大细胞糜蛋白酶是否存在于人增生性瘢痕组织中以及其是否是通过TGF-β1/Smads信号转导通路起到促纤维化作用。方法免疫组化检测增生性瘢痕组织和正常皮肤中肥大细胞的数量和糜蛋白酶的表达,采用不同浓度糜蛋白酶(0,15,30,60,120ng/mL)在不同时间段(6h,,12h,24h)作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞,MTT法检测增生性瘢痕成纤维细胞增殖,实时荧光定量PCR检测糜蛋白酶对胶原Ⅰ、Ⅲ、TGF-β1及血管紧张素mRNA表达的影响。Western blot技术检测不同浓度糜蛋白酶(0,60,120ng/mL)作用下体外培养增生性瘢痕成纤维细胞中TGF-β1、P-Smad2/3、Smad4和Smad7蛋白的表达。结果增生性瘢痕中肥大细胞和糜蛋白酶阳性表达明显强于对照组,肥大细胞糜蛋白酶促进增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,不同浓度的糜蛋白酶作用12小时后的胶原合成均高于对照组(P<0.05);60ng/mL的糜蛋白酶作用12小时时可以明显促进TGF-β1,磷酸化Smad2/3,Smad4和Smad7的蛋白表达,均高于对照组(P<0.05)。结论肥大细胞糜蛋白酶存在于增生性瘢痕中且活性表达。糜蛋白酶激活TGF-β1/Smad蛋白通道而促进增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成。
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