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目的:1.探讨单次临床剂量顺铂(cis-dischlorodiamm ine-platinum,CDDP)对大鼠肾间质纤维化指标的影响。2.探讨银杏叶提取物(Ginkgo Biloba extract,EGb)注射液(金纳多)对顺铂诱导的大鼠肾间质纤维化的改善作用及其可能机制,为临床上顺铂肾间质纤维化的治疗提供理论依据。方法:1.单次临床剂量顺铂诱导大鼠肾间质纤维化:将96只雄性SD大鼠随机分为正常组和顺铂组,每组48只。正常组与顺铂组大鼠于实验第1天分别单次腹腔注射等体积生理盐水和顺铂5mg/kg。两组大鼠分别于第8、14、21、30、40、50、60和90天共8个时间点分别处死6只大鼠。采用全自动生化分析仪测定血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(Serum creatinine,Scr)水平,采用HE染色评定肾小管间质损伤程度,采用Masson染色评定肾小管间质纤维化相对面积,采用SP法免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(Col I)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在肾组织中的表达情况。2.金纳多注射液改善顺铂诱导大鼠肾间质纤维化:将45只雄性SD大鼠随机分为正常组、顺铂组、金纳多低、中、高剂量组,每组9只。正常组:于实验第1天和第22至40天,腹腔注射等体积生理盐水,每天1次。顺铂组:于实验第1天单次腹腔注射顺铂5.0mg/kg,第22至40天腹腔注射等体积生理盐水,每天1次。金纳多低、中、高剂量组:于实验第1天单次腹腔注射顺铂5.0mg/kg,第22至40天分别腹腔注射金纳多注射液1.58、3.17、6.34mg/kg,每天1次。于实验第40天处死所有大鼠。检测血清BUN、Scr和尿液β-N-乙酰胺基葡萄糖苷酶(beta-Nacetyl glucosidas,NAG)水平,采用HE染色评定肾小管间质损伤程度,采用Masson染色评定肾小管间质纤维化相对面积,采用SP法免疫组化检测α-SMA和Col I在肾组织中的表达情况。3.金纳多注射液对顺铂诱导大鼠肾间质纤维化的改善作用的机制:采用SP法免疫组化检测TGF-β1在肾组织中的表达情况,采用WB检测TGF-β1、p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达情况,采用实时荧光定量PCR检测p38MAPKmRNA的表达。结果:1.单次临床剂量顺铂诱导大鼠肾间质纤维化:与正常组比较,顺铂组各时间点大鼠血清BUN和Scr水平、肾小管间质损伤指数、肾小管间质纤维化相对面积、肾组织的α-SMA、Col I和TGF-β1表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。2.金纳多注射液改善顺铂诱导大鼠肾间质纤维化:与正常组比较,顺铂组大鼠的血清BUN、Scr和尿液NAG水平、肾小管间质损伤指数、肾小管间质纤维化相对面积、肾组织的α-SMA和Col I表达水平均显著升高(P<0.01)。与顺铂组比较,金纳多低、中、高剂量组大鼠的血BUN、Scr、和尿液NAG水平、肾小管间质损伤指数、肾小管间质纤维化相对面积、肾组织的α-SMA和Col I表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。3.金纳多注射液对顺铂诱导大鼠肾间质纤维化的改善作用的机制:与正常组比较,顺铂组大鼠肾组织的TGF-β1表达水平、p-p38MAPK与p38MAPK的比值、p38MAPK mRNA的相对表达量均显著升高(P<0.01)。与顺铂组比较,金纳多低、中、高剂量组大鼠肾组织的TGF-β1表达水平、p-p38MAPK与p38MAPK的比值、p38MAPK mRNA的相对表达量均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:1.单次临床剂量顺铂可诱导大鼠肾间质纤维化。2.金纳多注射液可显著改善顺铂诱导的大鼠肾间质纤维化。3.金纳多注射液改善顺铂诱导大鼠肾间质纤维化的机制可能与抑制TGF-β1/p38MAPK通路有关。