食源性致病菌现场检测系统的研制

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近年来,频繁发生的食品安全事件加剧了人们对食品安全问题的担忧。食品安全事件频发的原因可大致分为4大类:原生食品生产中大量使用化学和生物试剂、原生食品加工中存在违法行为、食品市场管理不当、食品微生物安全检测技术和检测体系不完善。为从源头抑制带病菌原生食品流入生产,以及从终端把关即将流入市场的食品,迫切需要开发一套适用于基层的操作简便、高效、灵敏、准确的食源性致病菌现场检测系统。针对该问题,论文设计实现了一套基于磁珠吸附法、等温扩增技术以及激光检测技术的食源性致病菌现场检测系统。该检测系统包括两个装置:核酸提取装置和核酸检测装置。原始的病菌菌落在核酸提取装置中高温裂解、洗脱,得到菌体内核酸;核酸在检测装置的恒温环境中快速增殖,该过程中析出焦磷酸根离子,进而与缓冲液中的镁离子结合,生成焦磷酸镁沉淀;检测装置通过检测沉淀的浓度来表征核酸的增殖情况,并绘制出增殖曲线。论文的主要工作如下:(1)论文分析了核酸提取装置和核酸检测装置的工作原理,并且将两个装置按功能划分为5个单元:供电单元、恒温单元、人机交互单元、检测单元以及通信单元。(2)论文根据核酸提取装置和核酸检测装置的需求指标和功能要求,对食源性致病菌现场检测系统进行了总体设计,包括各功能单元的硬件设计和软件设计。其中建立了恒温单元的数学模型,并采用滑模变结构控制算法实现对系统的温度控制。(3)论文完成了核酸提取装置和核酸检测装置的硬件加工和软件编写,通过调试使得食源性致病菌现场检测系统能良好运行,并实现了系统恒温单元的温控精度要求。论文通过核酸提取实验、核酸电泳实验以及核酸检测实验,验证了核酸提取装置和核酸检测装置的可行性以及通道的一致性。可以看出,论文设计实现的食源性致病菌现场检测系统是一套集核酸提取功能、核酸增殖功能以及核酸检测功能于一体的完整检测系统,具有灵敏度高、检测准确、通道一致性好、温控精度高等优点。
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