目的：　　 是妊娠期特有的疾病,是导致围产期母儿死亡的主要原因。子痫前期的病因目前尚不能明确,但多数学者认为,孕早期绒毛外滋养细胞的侵袭不良,造成缺陷性胎盘的形成是其发病的根本原因。STOX1(Storkheadbox1)是由VanDijk等人在染色体10q22上发现的,存在于孕早期绒毛外滋养细胞中,具有调节绒毛外滋养细胞侵袭的功能。研究STOX1在子痫前期和正常胎盘组织中蛋白和mRNA表达水平的变化,探讨其与子痫前期发病之间的关系,有助于为子痫前期的临床防治提供新思路。　　 方法：　　 一、临床资料　　 选取2010年2月-2011年2月在中国医科大学附属第一医院产科病房住院患者中,经孕产妇及家属同意(已签署知情同意书)的子痫前期患者胎盘20例作为实验组。子痫前期诊断标准参照乐杰主编第七版《妇产科学》(妊娠20周以后出现的血压≥140/90mmHg;尿蛋白≥0.3g/24h或随机尿蛋白(+))。选择同期住院正常妊娠胎盘20例作为对照组。研究对象均为剖宫产分娩、单胎、初产妇。所有病例均无其他产科并发症及内外科合并症。　　 二、标本采集与处理　　 胎盘娩出后立即以脐带为中心取大小约1×1×1cm母体面中央区组织4块,避开钙化、机化及出血的胎盘组织块。生理盐水充分清洗。其中1块10%福尔马林液固定,常规石蜡包埋,供免疫组织化学用。其余3块冻存管内封存后立即投入液氮中保存,供Westernblot及Real-timePCR检测用。　　 三、实验方法　　 (一)免疫组织化学检测正常妊娠与子痫前期胎盘中STOX1的表达　　 石蜡切片常规脱蜡、水化,3%过氧化氢室温孵育,pH6.0柠檬酸缓冲液121℃高压热抗原修复,5%BSA室温封闭,STOX1-抗(1:150)4℃过夜,二抗37℃孵育,DAB显色,脱水、透明,封片后光学显微镜下观察结果。　　 (二)免疫印迹检测STOX1的蛋白表达　　 标本置于EP管中加入蛋白裂解液及蛋白酶抑制剂,机械匀浆、离心后取上清液考马氏亮蓝R250染色法测总蛋白浓度。煮样后电泳、转膜,5%脱脂牛奶封闭,加入一抗(1:500)4℃过夜,二抗(1:5000)室温孵育,ECL发光显像后观察结果。　　 (三)实时定量聚合酶链反应检测STOX1mRNA的表达水平　　 采用Trizol法提取并纯化总RNA,根据逆转录和扩增试剂盒进行逆转录和扩增。实时定量PCR反应条件:95℃30s预变性;95℃5s,60℃30s,40个循环,所有反应均设立复孔。采用△△CT法计算mRNA的相对含量。　　 四、统计学处理　　 采用SPSS19.0统计软件,计量资料用(X)±S表示,两样本均数比较采用t检验,阳性率的比较采用卡方检验,以P<0.05作为差异性检验水准。　　 结果：　　 1、免疫组化结果　　 阳性细胞率法测定,STOX1蛋白在正常胎盘组织中以合体滋养细胞胞核表达为主,伴有少量胞浆表达,占20%(4/20);而在子痫前期胎盘组织中胞核胞浆均有明显表达,其中胞浆表达占85%(17/20),两者胞浆表达有显著统计学差异(卡方检验,P<0.01)。　　 平均光密度值法测定,细胞浆内出现深棕色颗粒为阳性细胞。子痫前期胎盘中STOX1的平均光密度值(0.484±0.167)高于正常胎盘(0.121±0.011),两者间有明显统计学差异(t=4.01,P<0.01)。　　 2、Westernblot结果　　 子痫胎盘组织STOX1/β-Actin灰度比为1.002±0.121,明显高于其在正常胎盘组织中表达0.301±0.118,两者之间有显著统计学差异(t=8.608,P<0.01)。　　 3、Real-timePCR结果　　 在子痫前期胎盘组织中STOX1mRNA的表达水平(0.756±0.027)明显高于其在正常胎盘组织中的表达(0.632±0.025)(t=14.659,P<0.01)。　　 结论：　　 子痫前期胎盘组织中STOX1表达明显升高。