姬松茸多糖的制备及其抗氧化、保肝作用研究

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姬松茸(Agaricus blazei Murill)是一种珍贵的食药兼用的真菌,因其味道鲜美、药用价值高,深受人们的喜爱。姬松茸具有增强免疫力、抗肿瘤、抗病毒、降血糖等多种生理活性,其多糖含量居食用蕈菌之首,在医药领域和保健品行业中具有很高的开发应用前景。但是国内外对姬松茸多糖抗氧化、保肝作用研究较少,本文以姬松茸为原料,超滤制备得到姬松茸级分多糖,并研究了姬松茸活性多糖的抗氧化作用及其对D-半乳糖胺(GalN)诱导小鼠肝损伤的保护作用,结果如下:1、在单因素试验的基础上,经中心组合试验和响应面分析(RSA),得到姬松茸多糖提取的最佳工艺条件为:提取温度100℃,提取时间3.36h,料液比1:20。该条件下多糖得率预测值为8.727%,验证值为8.718%。2、采用木瓜蛋白酶-Sevag联合法脱去姬松茸多糖中的蛋白,这种脱蛋白方法不仅效果好,且多糖损失率小,明显优于单独使用Sevag法。通过研究姬松茸多糖的超滤分级,确定了其工艺条件为:多糖浓度控制在30mg/mL(100kDa膜)、25mg/mL(10kDa膜)以下,超滤温度20℃-30℃,pH7-8,压力0.08MPa左右。按分子量大小可将姬松茸多糖分级为3个级分:ABMP1 (>100kDa)、ABMP2 (10kDa-100kDa)和ABMP3(<10kDa),其比例大约为2.36:1.17:1,总回收率为79.16%。3、姬松茸多糖都是中性糖,不含糖醛酸。ABMP1、ABMP2、ABMP3都是不含多酚的非淀粉多糖。采用气相色谱法分析姬松茸级分多糖的单糖组成,发现ABMP1、ABMP3主要由葡萄糖构成;ABMP2由岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖构成,其摩尔比为1:1.02:6.69:4.40。4、姬松茸多糖具有较明显的抗氧化活性。比较研究姬松茸级分多糖ABMP1、ABMP2和ABMP3的抗氧化活性强弱,发现分子量为10kDa-100kDa的姬松茸级分多糖ABMP2抗氧化活性最强,因此选取ABMP2进行后续的保肝作用研究。5、研究了姬松茸粗多糖ABMP和姬松茸级分多糖ABMP2对GalN诱导的小鼠肝损伤的保护作用。在与模型组对比的情况下,ABMP、ABMP2各剂量组均能降低实验小鼠的肝脏指数和脾脏指数,降低实验小鼠AST、ALT和肝组织中MDA含量,同时提高实验小鼠肝中GSH含量;病理切片图也表明ABMP、ABMP2各剂量组能够不同程度地减轻实验小鼠肝细胞的损伤程度,且ABMP2的保肝作用要优于ABMP,高剂量ABMP2对GalN诱导的小鼠肝损伤保肝作用最好。其保肝作用机制有待进一步的研究。
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