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本项研究首次对适合水曲柳组织培养的各种外植体进行筛选,并研究通过多种途径进行水曲柳植株再生的可行性。最终通过下胚轴增生不定芽和腋芽增生的途径建立了两套较为完整的水曲柳组织培养再生系统。首次选用将MS培养基中的所有元素都减半的MS1/2培养基作为水曲柳腋芽增生的专用培养基。 以不同休眠程度和处理的水曲柳种子进行离体培养试验。结果表明,采用切开种子的方法进行离体培养可提高种子发芽率,其中横切1/2的种子萌发最好。经过层积处理的种子优于未经催芽处理的种子。通过对四种不同培养基和0.1mg/L~5.0mg/L浓度范围内的BA培养效果的对比,认为切开种子在附加蔗糖2%,3mg/L BA的MS培养基中生长最好。 通过不定芽增生的途径获得再生植株时,初步选用无菌苗的下胚轴、子叶、胚根、叶柄和茎段等营养器官,以及种子的下胚轴、幼嫩的花序轴和茎段几种外植体进行培养。其中,直接从种子中剥离的下胚轴不定芽诱导效果最好。在MS+TDZ0.1mg/L+IBA0.01~0.1mg/L培养基中不定芽诱导率为89.6%,不定芽的存活率达到48.7%。 在腋芽增生的研究中,外植体包括无菌苗和成年树上的节,休眠芽和展叶芽。统计结果表明,以无菌苗的节作为外植体,MS1/2+1.5mg/LBA+0.1mg/L NAA培养基中腋芽增生效果最好,腋芽的增生率可达到61.5%。 在愈伤组织诱导实验中,采用无菌苗的子叶、胚根、无节茎段、带顶芽茎段和下胚轴以及种子下胚轴、幼嫩的花序轴和茎段分别进行诱导。带顶芽茎段愈伤组织的诱导率达到90.5%,愈伤组织直径大于1.3cm,绿色,颗粒状,长势最好。 水曲柳无菌苗生根相对容易。组培苗采取直接生根和间接生根两种方式进行生根。生长素的添加对水曲柳的生根起决定作用,细胞分裂素对水曲柳的生根有抑制作用。NAA比IBA诱导生根的效果好,在NAA0.5mg/L时,达到最大生根率63.7%。生根苗容易诱导成活。