背景：增食欲素(orexin)是1998年发现的一种神经肽，分为均来自于同一前体的orexinA及orexinB。orexin及其受体广泛并有差异的分布于脑组织中，同时也表达于肾脏、甲状腺、睾丸、卵巢、空肠、肺等外周组织里，参与调节了多种生理功能，包括食欲、能量代谢、睡眠觉醒、生长、神经内分泌、生殖系统功能等，这些功能由结合两种G蛋白偶联受体——orexin受体1(OX1R)及orexin受体2来实现。　　最近的研究指出orexin能够与HPA轴相互作用，影响糖皮质激素的释放、肾上腺皮质细胞增殖以及多种肾上腺皮质的盐皮质激素的释放。3-β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)在糖皮质激素合成中至关重要，不仅存在于肾上腺皮质、性腺和胎盘，而且也存在于肝等几乎所有的周围组织中，并在不同的组织中具有不同的生物活性。有报道称orexinA能够刺激H295R细胞的糖皮质激素分泌，并且这个升高伴随着3β-HSD的mRNA的高表达，但其中涉及的细胞通路机制仍所知甚少。　　尽管近年来关于orexin及其受体的研究逐渐深入，其激活人肾上腺MAPK级联的细胞内信号转导的确切机制尚属未知。因此，本研究旨在用多能肾上腺H295R细胞系验证orexinA的效应并进一步阐明orexin受体A在MAPK通路上的激活机制，相信这对于加深对orexin系统细胞转导通路成分的了解有所裨益。　　实验方法：　　体外培养人肾上腺H295R细胞，分别加入不同浓度的orexinA和/或OX1R特异性抑制剂(SB334867)，western-blot技术检测细胞蛋白表达;MTT法检测H295R细胞增殖;凋亡试剂盒检测H295R细胞凋亡。其后分别加入SB334867和/或ERK1/2或p38特异性拮抗剂进行干预，western-b1ot检测ERK1/2及p38磷酸化蛋白的水平。　　实验结果：　　orexinA对H295R细胞增殖的影响:用不同浓度的orexinA培育H295R细胞后检测增殖均有所增加，这种增加可以被OX1R特异性拮抗剂、ERK1/2特异性拮抗剂、p38特异性拮抗剂或其二者联合所削弱。　　orexinA对H295R细胞凋亡的影响:用不同浓度的orexinA培育H295R细胞后检测凋亡均被抑制，这种抑制效果可以被OX1R特异性拮抗剂、ERK1/2特异性拮抗剂、p38特异性拮抗剂或其二者联合所削弱。　　orexinA对H295R细胞中OX1R蛋白活性的影响:用不同浓度的orexinA(10-10M，10-8M，and10-6M)培育H295R细胞后检测OX1R蛋白的磷酸化水平，结果均有所上调，其中10-6M浓度下上调达最高。　　orexinA对H295R细胞中3β-HSD蛋白活性的影响:用不同浓度的orexinA培育H295R细胞后检测3β-HSD蛋白的磷酸化水平均上调，这种上调可以被OX1R特异性拮抗剂、ERK1/2特异性拮抗剂、p38特异性拮抗剂或其二者联合所削弱。　　orexinA对H295R细胞调节所涉及的信号通路:用不同浓度的orexinA培育H295R细胞，p38、ERK1/2蛋白活性有所增加，这种增加被OX1R特异性拮抗剂、p38特异性拮抗剂、ERK1/2特异性拮抗剂或其二者联合所抑制;用不同浓度的orexinA培育H295R细胞，JNK磷酸化蛋白水平未见明显变化。　　结论：　　orexinA通过OX1R、ERK1/2及p38信号途径影响体外培养的人肾上腺H295R细胞的细胞增殖，并增强H295R细胞中3β-HSD蛋白活性。