应用激光扫描共聚焦技术对脑脊液中脑膜癌细胞EMA、CEA的研究

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目的研究EMA、CEA在脑脊液脑膜癌细胞中的精确定位及荧光定量分析,测定脑膜癌患者脑脊液细胞中EMA、CEA的表达率及其相关性,并探讨其作为脑膜癌临床检测肿瘤标志物的可能性,为脑膜癌早期诊断提供实验和理论依据。方法(1)应用免疫荧光细胞化学法以小鼠抗人单克隆EMA、兔抗人CEA双重标记脑膜癌细胞及对照组脑脊液细胞。(2)采用激光扫描共聚焦显微技术获得脑膜癌细胞三维断层扫描图象、EMA/CEA荧光强度立体地形分布图,并定量检测EMA/CEA相对荧光强度值。结果(1)应用LSCM可见EMA、CEA呈复合型分布,主要表达于癌细胞胞浆和胞膜。(2)脑膜癌细胞EMA、CEA平均荧光值分别为(44.84±13.05;36.80±17.17),与对照组(3.98±1.58;4.87±1.86)相比有显著统计学差异(P<0.01)。(3)本实验方法检出脑膜癌细胞的阳性率(90%)高于常规脑脊液细胞学MGG染色(60%),两组比较有统计学差异(P<0. 05)。(4)EMA、CEA的表达与脑膜癌患者年龄无关(P>0.05)。结论(1)初步建立了免疫荧光细胞化学和激光扫描共聚焦显微镜技术检测脑脊液中脑膜癌细胞EMA、CEA的方法。(2)EMA、CEA在脑膜癌组中高表达,对照组中未表达,提示其可以作为脑膜癌临床检测一线肿瘤标记物。(3)联合应用免疫荧光细胞化学及LSCM测定脑脊液细胞中EMA、CEA的表达可提高脑膜癌病的诊断率。
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