论文部分内容阅读
柑橘细菌性溃疡病(Citrus bacterial canker disease, CBCD)是一种国内外检疫性病害,严重制约着柑橘产业的发展。因此,创制抗病品种是解决溃疡病危害的一个重要途径。本研究通过根癌农杆菌转化,将pthA基因和Xa27基因转化溃疡病敏感类型柠檬(Citrus. Lemon L.)中,获得转基因植株,并对转基因植株进行鉴定和接种分析。主要结果如下：1、通过农杆菌介导的上胚轴转化方法,pthA基因转化约500个外植体,鉴定57株柠檬,其中阳性植株45株,阳性率为78.9%。Xa27基因转化约1000个外植体,鉴定29株柠檬,其中阳性植株10株,阳性率为34.5%。2、通过基因表达分析,筛选pthA转化的#7、#22、#23三个系进行溃疡病接种试验,发现,接种4d后,野生型和转基因植株均开始发病。但前者发病率达到100%,病点率86%。转基因株系#7和#23发病率虽然达100%,但病点率分别为72%和47%,较野生型低。同时发现,野生型植株病斑显著大于#7和#23。转基因株系#22发病率为75%,病点率为33%,病斑大小为0.028cm2,三个参数均低于野生型柠檬。在病情指数上,转基因柠檬三个系都明显低于野生型。表明,转基因植株抗溃疡病能力增强。3、对转Xa27柠檬#5和#25两个系进行溃疡病接种试验。接种4d后发现,转基因株系#5和#25发病率分别为50%和33.3%,病点率分别为14%和40%,病斑大小分别为0.019cm2和0.012cm2,远远小于野生型柠檬的病斑大小,且两个转基因系的病情指数都比野生型低,表现出转Xa27柠檬具有一定的抗病性。表明,转基因植株抗溃疡病能力增强。