RNAi沉默survivin基因对胃癌及白血病细胞生长的抑制作用

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本实验的目的:探讨Survivin在胃癌组织中的表达及意义。应用RNAi技术沉默Survivin基因观察其抗肿瘤作用。方法:1.应用免疫组织化学方法检测54例胃癌及27例癌旁组织和10例正常胃粘膜组织Survivin蛋白表达,并结合临床指标、预后进行分析;2.针对Survivin mRNA序列设计合成编码siRNA的DNA模板,构建两对pGCsilencer U6/GFP/Survivin siRNA重组质粒,转染人胃癌细胞SGC-7901和人白血病细胞K562,进行体外研究。结果:1.癌旁组织与癌组织中Survivin高表达,正常胃粘膜不表达,Survivin表达与性别、年龄、淋巴结转移、临床分期均无关(P>0.05),而与肿瘤分化程度及生存预后有关;2.成功构建pGCsilencer U6/GFP/Survivin siRNAs重组质粒,并成功转染人胃癌细胞及白血病细胞;3.Western blot,RT-PCR结果证实重组质粒在蛋白及mRNA水平分别显著抑制survivin基因表达;4.MTT及流式细胞仪结果证明上述重组质粒可显著抑制胃癌细胞及白血病细胞的体外生长,并诱导其凋亡。结论:RNAi技术沉默Survivin显示出了明显的抗胃癌及白血病作用。本研究首次将Survivin的临床研究与基础研究结合起来,首次应用RNAi技术沉默Survivin基因在胃癌细胞SGC-7901和人白血病细胞K562内的表达,并诱导肿瘤细胞凋亡。具有较高的应用价值,为肿瘤的基因治疗提供理论和实践依据。
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