目的第Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶亦称为Sirtuins,即沉默信息调节因子2(silent information regulator2,Sir2)的同源蛋白,研究表明SIRT1与肿瘤的发生密切相关,有望成为肿瘤表观遗传学治疗的新靶点。本研究通过化学合成靶向SIRT1基因的小干扰RNA(siRNA),脂质体法转染人宫颈癌细胞株HeLa,观察siRNA沉默SIRT1基因对HeLa增殖、细胞凋亡及Notch信号通路的影响。方法化学合成靶向SIRT1基因的小干扰RNA(siRNA),分别州终浓度为15nmol/L、30nmol/L、45nmol/L的siRNA SIRT1转染人宫颈癌HeLa细胞,转染后72h倒置相差显微镜下观察细胞形态,并收集细胞提取细胞总RNA进行RT-PCR检测,以优化siRNASIRT1最佳转染条件。人宫颈癌HeLa细胞分为:正常对照组、阴性siRNA转染组、转染试剂对照组及siRNASIRT1转染组,转染72h后,分别提取各组细胞总RNA及蛋白,应用RT-PCR检测SIRT1mRNA表达水平,Western blot检测SIRT1蛋白表达水平,确定siRNA干扰率;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;分别应用Hoechst染色和流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白P53、P21、Survivin 及 Notch 信号通路蛋白 Notchl、Hesl 及 cyclin D1的表达。.结果RT-PCR结果显示:30nmol/L的siRNA对Hela细胞的干扰作用最为明显:RT-PCR及Western blot结果显示siRNA SIRT1转染细胞组,SIRT1 mRNA水平和蛋白表达理明显低于对照组;CCK-8细胞增殖实验结果表明,与正常组相比,siRNASIRT1转染组细胞生长受抑制,增殖指数显著下降;Hoechst33258染色显示siRNASIRT1转染组细胞呈现典型的凋亡形态学改变;流式细胞仪结果表明,siRNASIRT1转染组的细胞凋亡率15.9%,而阴性siRNA转染组凋亡率仅 3.9%;Western blot 结果显示 siRNASIRT1 转染组 P53 蛋白的表达增加 126.6%(p<0.05);P21蛋白的表达增加 58.6%(p<0.05);Survivin 蛋白的表达减少 50.6%(p<0.05);Notch1、Hes1 及cyclinD1蛋白表达明显上调。结论靶向SIRTI基因的siRNA能有效抑制SIRT1基因及蛋白的表达,抑制HeLa细胞增殖并诱导细胞凋亡,siRNASIRT1诱导的HeLa细胞凋亡,P53、P21、Survivin及Notchl通路关系密切,但siRNA SIRT1诱导HeLa细胞凋亡的详尽机制有待进一步研究。