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前列腺癌为西方国家最常见的恶性肿瘤，居西方国家男性所有恶性肿瘤发病率的第二位，死亡率的首位。我国前列腺癌的发病率呈逐年上升趋势，目前已位居泌尿系统恶性肿瘤的第三位。前列腺癌从发生到临床表现需要长达十几年甚至几十年的时间。大量研究表明，正常前列腺组织发展为前列腺癌经历了前列腺上皮细胞内瘤、局部前列腺癌、侵袭性前列腺癌和转移性前列腺癌等阶段。约2／3的前列腺癌患者就诊时已是晚期，只能采用雄激素阻断为主的综合治疗。阻断雄激素能有效的缓解前列腺癌症状，但12～18个月后，约1／3的病人前列腺癌会复发，并转变为雄激素非依赖性前列腺癌。目前，临床上尚无有效的方法来治疗雄激素非依赖性前列腺癌，因此对该类患者的治疗已经成为临床关注的焦点之一。在雄激素依赖性前列腺癌细胞向雄激素非依赖性前列腺癌细胞的转化过程中，有多种因子参与或介导。近年来研究表明，Caveolin-1不仅与维持胆固醇平衡、信号转导、物质转运等多种生理功能密切相关外，而且在恶性肿瘤发生、发展的多方面、多环节上发挥着关键的调控作用。新近研究发现Caveolin-1在前列腺癌尤其是进展期前列腺癌中呈高表达，可能参与前列腺癌的发生与发展。他汀类药物，羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶的抑制剂，是目前临床治疗动脉粥样硬化极为重要的一类调脂药。最近的研究发现，他汀类药物对人白血病细胞株HL-60、黑素瘤、纤维瘤、乳腺癌等多种细胞有明显抑制增殖及诱导凋亡的作用。但是，他汀类药物能否抑制前列腺癌细胞尤其是雄激素非依赖性前列癌细胞的增殖并诱导凋亡，以及是否通过Caveolin-1基因发生作用，目前尚未见相关文献报道。本研究采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western blot法检测人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3和PC-3m细胞系中Caveolin-1mRNA及蛋白表达情况，初步探讨Caveolin-1过表达是否与前列腺癌的侵袭和转移有关；采用HMA-CoA还原酶抑制剂辛伐他汀观察其对人前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡及Caspase-9，8，3活性与Caveolin-1表达的影响，探讨辛伐他汀对人前列腺癌的作用及可能的分子机制，为临床上前列腺癌的预防与治疗提供新的理论与方法。第一章Caveolin-1在人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3和PC-3m细胞中的表达及意义目的：研究人前列腺癌PC-3和PC-3m细胞中Caveolin-1mRNA及蛋白质的表达，分析Caveolin-1与前列腺癌发生发展的关系，探讨Caveolin-1过表达在PC-3m具有高侵袭性和转移性中的作用，为雄激素非依赖性前列腺癌基因治疗提供新靶点。方法：以人前列腺癌PC-3和PC-3m细胞系为研究对象，采用半定量逆转录聚合酶链式反应(R7-PCR)、Western blot法检测Caveolin-1mRNA及蛋白质的表达。结果：1．人前列腺癌PC-3和PC-3m细胞中均有Caveolin-1mRNA的表达，PC-3m细胞中的Caveolin-1表达水平明显高于PC-3细胞，两者有显著性差异(P＜0.05)。2．人前列腺癌PC-3和PC-3m细胞中均有Caveolin-1蛋白质表达，PC-3m细胞中Caveolin-1蛋白质表达量较PC-3细胞增加，两者有显著性差异(P＜0.05)。结论：1．PC-3、PC-3m细胞中存在Caveolin-1mRNA及蛋白质表达。2．Caveolin-1过表达可能与人前列腺癌的侵袭和转移有关。3．Caveolin-1可作为前列腺癌基因治疗的一个靶点。第二章辛伐他汀对人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞的作用研究目的：观察辛伐他汀对人前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡的影响，探讨辛伐他汀对人前列腺癌的作用及可能分子机制。方法：四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测PC-3细胞的增殖；Hoechst 33258染色后荧光显微镜法观察PC-3细胞凋亡的形态学改变，并计算凋亡核百分率；Annexin V-FITC／PI双染色，流式细胞术检测细胞凋亡；Caspase活性定量检测试剂盒检测半胱天冬特异性蛋白酶-9，8，3(Caspase-9，8，3)的活性；RT-PCR及Western blot检测Caveolin-1mRNA及蛋白质的表达。结果：1．辛伐他汀可显著抑制PC-3细胞的体外增殖，并呈浓度和时间依赖性(P＜0.05)。2．Hoechst 33258染色显示PC-3细胞经辛伐他汀(20μmol／L)分别处理24h和48h后，细胞出现凋亡，形态学变化表现为凋亡细胞体积缩小，核固缩，镜下细胞核呈致密浓染或碎块状致密浓染。FACS检测结果显示，20μmol／L辛伐他汀处理12h、24h、48h后的凋亡细胞数分别为14.81±1.08％、23.42±2.33％、40.77±4.06％。PC-3细胞分别经10μmol／L、20μmol／L、40μmol／L辛伐他汀处理48h后，凋亡细胞数逐渐增多，凋亡核百分率计数分别为(11.20±3.33)％，(31.20±3.08)％，(56.24±4.50)％。FAGS检测结果显示，10μmol／L、20μmol／L、40μmol／L辛伐他汀处理PC-3细胞48h后的凋亡细胞数分别为17.26±1.44％、32.45±2.56％、60.47±3.98％。PC-3细胞经辛伐他汀(20μmol／L、40μmol／L)处理12h后，Caspase-9，8，3的活性显著增加。3．RT-PCR及Western blot检测显示10μmol／L、20μmol／L、40μmol／L辛伐他汀处理48h后Caveolin-1mRNA及蛋白质表达水平均降低。结论：1．辛伐他汀能明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的体外增殖。2．辛伐他汀可诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡。3．辛伐他汀抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖及诱导PC-3细胞凋亡可能与降低Caveolin-1的表达有关。4．HMA-CoA还原酶抑制剂为临床上前列腺癌的预防与治疗提供了一种新方法。